Основными клетками соединительной ткани являются фибробласты (семейство фибриллообразующих клеток), макрофаги, тучные клетки, адвентициальные клетки, плазматические клетки, перициты, жировые клетки, а также лейкоциты, мигрирующие из крови; иногда встречаются пигментные клетки.
Фибробласты (фибробластоциты) (от лат. fibra - волокно, греч. blastos - росток, зачаток) - клетки, синтезирующие компоненты межклеточного вещества: белки (например, коллаген, эластин), протеогликаны, гликопротеины. В эмбриональном периоде ряд мезенхимных клеток зародыша дают начало дифферону фибробластов, к которому относят: стволовые клетки, полустволовые клетки-предшественники, малоспециализированные фибробласты, дифференцированные фибробласты (зрелые, активно функционирующие), фиброциты (дефинитивные формы клеток), миофибробласты и фиброкласты. С главной функцией фибробластов связаны образование основного вещества и волокон (что ярко проявляется, например, при заживлении ран, развитии рубцовой ткани, образовании соединительнотканной капсулы вокруг инородного тела).
Фибробласты – это подвижные клетки. В их цитоплазме, особенно в периферическом слое, располагаются микрофиламенты, содержащие белки типа актина и миозина. Движение фибробластов становится возможным только после их связывания с опорными фибриллярными структурами с помощью фибронектина - гликопротеина, синтезируемого фибробластами и другими клетками, обеспечивающего адгезию клеток и неклеточных структур. Во время движения фибробласт уплощается, а его поверхность может увеличиться в 10 раз. По способности синтезировать фибриллярные белки к семейству фибробластов можно отнести ретикулярные клетки ретикулярной соединительной ткани кроветворных органов, а также хондробласты и остеобласты скелетной разновидности соединительной ткани.
Фиброциты - дефинитивные (конечные) формы развития фибробластов. Эти клетки веретенообразные с крыловидными отростками. Они содержат небольшое число органелл, вакуолей, липидов и гликогена. Синтез коллагена и других веществ в фиброцитах резко снижен.
Миофибробласты - клетки, сходные с фибробластами, сочетающие в себе способность к синтезу не только коллагеновых, но и сократительных белков в значительном количестве. Фибробласты могут превращаться в миофибробласты, функционально сходные с гладкими мышечными клетками, но в отличие от последних имеют хорошо развитую эндоплазматическую сеть. Такие клетки наблюдаются в грануляционной ткани заживающих ран и в матке при развитии беременности.
Фиброкласты - клетки с высокой фагоцитарной и гидролитической активностью, принимают участие в «рассасывании» межклеточного вещества в период инволюции органов (например, в матке после окончания беременности). Они сочетают в себе структурные признаки фибриллообразующих клеток (развитую гранулярную эндоплазматическую сеть, аппарат Гольджи, относительно крупные, но немногочисленные митохондрии), а также лизосомы с характерными для них, гидролитическими ферментами. Выделяемый ими за пределы клетки комплекс ферментов расщепляет цементирующую субстанцию коллагеновых волокон, после чего происходят фагоцитоз и внутриклеточное переваривание коллагена. Следующие клетки волокнистой соединительной ткани уже не относятся к дифферону фибробластов.
Макрофаги (или макрофагоциты) (от греч. makros - большой, длинный, fagos - пожирающий) - это гетерогенная специализированная клеточная популяция защитной системы организма.
Формы проявления защитной функции макрофагов:
1. поглощение и дальнейшее расщепление или изоляция чужеродного материала;
2. обезвреживание его при непосредственном контакте;
3. передача информации о чужеродном материале иммунокомпетентным клеткам, способным его нейтрализовать;
4. оказание стимулирующего воздействия на другие клеточные популяции защитной системы организма.
Макрофаги имеют органеллы, синтезирующие ферменты для внутриклеточного и внеклеточного расщепления чужеродного материала, антибактериальные и другие биологически активные вещества (например: протеазы, кислые гидролазы, пироген, интерферон, лизоцим и др.).
Тучные клетки (или тканевые базофилы, или же лаброциты). В их цитоплазме находится специфическая зернистость, напоминающая гранулы базофильных лейкоцитов крови. Тучные клетки являются регуляторами местного гомеостаза соединительной ткани. Они принимают участие в понижении свертываемости крови, повышении проницаемости гематотканевого барьера, в процессах воспаления и иммуногенеза. У человека тучные клетки обнаруживаются всюду, где имеются прослойки рыхлой волокнистой соединительной ткани. Особенно много тканевых базофилов в стенке органов желудочно-кишечного тракта, матке, молочной железе, тимусе, миндалинах. Они часто располагаются группами по ходу кровеносных сосудов микроциркулярного русла - капилляров, артериол, венул и мелких лимфатических сосудов.
Плазматические клетки (или плазмоциты). Эти клетки обеспечивают выработку антител - гамма-глобулинов при появлении в организме антигена. Они образуются в лимфоидных органах из B-лимфоцитов, обычно встречаются в рыхлой волокнистой соединительной ткани собственного слоя слизистых оболочек полых органов, сальнике. Адипоциты (или жировые клетки). Так называют клетки, которые обладают способностью накапливать в больших количествах резервный жир, принимающий участие в трофике, энергообразовании и метаболизме воды. Адипоциты располагаются группами, реже поодиночке и, как правило, около кровеносных сосудов. Накапливаясь в больших количествах, эти клетки образуют жировую ткань – разновидность соединительной ткани со специальными войствами.
Адвентициальные клетки. Это малоспециализированные клетки, сопровождающие кровеносные сосуды. Они имеют уплощенную или веретенообразную форму со слабобазофильной цитоплазмой, овальным ядром и небольшим числом органелл. В процессе дифференцировки эти клетки могут, по-видимому, превращаться, в фибробласты, миофибробласты и адипоциты. Перициты - (или клетки Руже) клетки, окружающие кровеносные капилляры и входящие в состав их стенки.
Пигментные клетки (пигментоциты, меланоциты). Эти клетки содержат в своей цитоплазме пигмент меланин. Их много в родимых пятнах, а также в соединительной ткани людей черной и желтой рас. Пигментоциты имеют короткие, непостоянной формы отростки, большое количество меланосом (содержащих гранулы меланина) и рибосом.
Межклеточное вещество, или внеклеточный матрикс (substantia intercellularis), соединительной ткани состоит из коллагеновых и эластических волокон, а также из основного (аморфного) вещества. Межклеточное вещество как у зародышей, так и у взрослых образуется, с одной стороны, путем секреции соединительнотканными клетками, а с другой - из плазмы крови, поступающей в межклеточные пространства.
Коллагеновые структуры, входящие в состав соединительных тканей организмов человека и животных, являются наиболее представительными ее компонентами, образующими сложную организационную иерархию. Основу всей группы коллагеновых структур составляет волокнистый белок - коллаген, который определяет свойства коллагеновых структр. Эластические волокна Наличие эластических волокон в соединительной ткани определяет ее эластичность и растяжимость. По прочности эластические волокна уступают коллагеновым. Форма поперечного разреза волокон округлая и уплощенная. В рыхлой волокнистой соединительной ткани эластические волокна широко анастомозируют друг с другом.
Основное направление деятельности современной эстетической медицины - предотвращение старения при помощи высоких технологий. В результате научных исследований выявлена закономерность, заключающаяся в том, что клетки имеют способность возрождаться. Обладают этими свойствами и фибробласты, регенерация которых приводит к омоложению кожных покровов и устранению видимых дефектов на них.
Функции и природа фибробластов
Термин «фибробласты» состоит из двух латинских слов, переводимых буквально как «росток» и «волокно». По своей природе они представляют клетки соединительной ткани, синтезирующие внеклеточный матрикс (структуру ткани, которая обеспечивает перенесение химических веществ и механическую поддержку клеток кожи). Фибробласты вырабатывают вещества, которые являются предшественникам коллагеновых и эластиновых волокон, гиалуроновую кислоту, фибрин.
Происходят они из мезенхимы - зародышевой ткани, которая есть в клетках организма людей и животных. В активном состоянии структура фибропластов подразумевает наличие ядра и отростков, они имеют увеличенный размер и содержат большое количество рибосом, в состоянии покоя они уменьшаются и приобретают веретенообразную форму.
Фибробласты кожи обладают широким спектром функций. Благодаря их наличию в организме происходят следующие процессы:
- Активизация процессов синтеза коллагена и эластина.
- Формирование сосудов.
- Направление клеток иммунной системы к бактериям и чужеродным частицам.
- Ускорение разрастания тканей.
- Усиление роста клеток.
- Заживление поврежденных участков кожи.
- Выработка ряда белков (протеогликан, ламинин и другие).
Причины возрастных изменений
Молодость кожи определяется цикличным процессом выработки коллагена и эластина, которые впоследствии расщепляются на составные части, используемые фиброластами для их повторной выработки. Со временем последние снижают свою активность, переставая производить коллагеновые и эластиновые волокна, что в конечном итоге провоцирует старение кожи.
Возрастные изменения начинают проявляться уже с 28 — 30 лет. Они выражаются в потере упругости и развитии птоза, изменении цвета кожи, повышении сухости, образовании морщин. И все это в связи с тем, что каждое десятилетие фибробласты уменьшаются на 10 % от первоначального числа.
Восполнение количества фибробластов
Итак, для того чтобы замедлить старение и вернуть молодость необходимо восстановить фибробласты . Большинство современных косметологических методик приводит лишь к временному ускорению синтеза коллагеновых волокон, но не увеличивают сами клетки. Долгое время было принято считать, что это попросту невозможно.
В настоящее время наука шагнула далеко вперед, и восстановление фибробластов это уже не фантастика. Данная процедура получила название SPRS-терапия и широко практикуется в Штатах, европейских странах и с недавнего времени на территории России.
SPRS-терапия: особенности и принцип проведения
Восстановить фибробласты непросто, для этого требуется пройти через сложнейшую инъекционную процедуру. Результатами ее проведения являются утолщение кожи и повышение уровня ее эластичности, профилактика и снижение птоза. Также уменьшаются морщины, исчезает пигментация и разглаживаются рубцы.
Начинается терапия с забора клеток пациента с кожи, расположенной за ушной раковиной. Полученный образец используется для диагностики и изучения, именуется биоматериалом. Он применяется для разработки схемы лечения и искусственного воссоздания фибробластов, которые впоследствии при помощи уколов будут введены обратно в кожу.
Клетки, выращенные на основе биоматериалов пациента, не отторгаются организмом. После трансплантации они сохраняют свою активность в течение полутора лет, на протяжении которых состояние кожи улучшается.
Фибробласты не рекомендуется внедрять посредством инъекций во время обострения хронических заболеваний, при простуде, вирусных инфекциях, сопровождающихся повышенной температурой тела. Среди противопоказаний числится иммунодефицит, злокачественные образования, инфекции и хронические заболевания в острой стадии. Перед проведением процедуры обязательна предварительная консультация со специалистом для выявления индивидуальных противопоказаний.
Процедура занимает не более часа и проводится курсом из 2 сеансов с перерывом от 5 до 7 недель. Перед инъекциями обязательно проведение местной анестезии.
Внедрить фибробласты - удовольствие дорогостоящее. Полный спектр услуг, включающий забор, хранение, исследование и введение биоматериалов оценивается примерно в 400 000 рублей.
Видео: проведение SPRS терапии
Фибробласты - клетки соединительной ткани, обеспечивающие выработку коллагена и эластина, следовательно, поддерживающие молодость нашей кожи. Со временем их количество в организме неуклонно снижается, за счет чего и проявляются внешние признаки возрастных изменений. Восстановление числа фибробластов проводится посредством инъекционной методики на основе искусственно выращенных клеток.
Пожалуй, из всех доступных сегодня клеточных технологий омоложения в России - фибробласты - самая логичная, здоровая и надежная. Благодаря принципиально новому методу омоложения - клеточной терапии - сегодня уже возможно осуществить самые смелые мечты и прекрасно выглядеть в любом возрасте.
Терапия фибробластами легально и достаточно успешно применяется во многих странах. С 1999 года используется методика лечения и омоложения собственными фибробластами в США, Англии и Швейцарии. Стоит такая процедура 5-7 тысяч долларов. Среди счастливчиков, воспользовавшихся данной методикой омоложения, есть и наши соотечественники. В России даже возник новый вид туризма - ездить за рубеж омолаживаться фибробластами.
Возникает вполне закономерный вопрос, а почему столько внимания именно фибробластам? Что это за клетки? Как они «работают»? Что в них такого уникального и, самое главное, полезного для нас?
Начинаем разбираться…..
ЧТО ТАКОЕ ФИБРОБЛАСТЫ
Фибробласт (от «fibra» - «волокно», «blastos» - «росток») - наиболее распространенная и ценная клетка рыхлой соединительной ткани. Они имеют круглую или удлиненную, веретенообразную плоскую форму с множеством отростков и плоским овальным ядром. Предшественниками фибробластов являются фибробластоподобные или мезенхимальные стволовые клетки. Фибробласты являются основными клетками среднего слоя кожи, называемого дермой , формируют ее каркас и являются «фабриками» по производству биологически активных веществ. Основная их роль (функция) - метаболизм межклеточного вещества.
ФУНКЦИИ ФИБРОБЛАСТОВ
1. Фибробласты «производят» и выделяют в межклеточное пространство вещества, которые обеспечивают тургор, эластичность и упругость кожи. К ним относятся коллагеновые (отвечают за прочность кожи) и эластиновые волокна (обеспечивают за эластичность, растяжимость и сократимость кожи), а также желеподобный гель, заполняющий пространство между клетками, которое называется межклеточным веществом. Компонентами межклеточного вещества являются: известная всем гиалуроновая кислота (удерживает воду в коже, тем самым поддерживает тургор, упругость и наполненность) и менее «знаменитые», но при этом важные гликозаминогликаны, хондроитинсульфат, нидоген, ламинин, тинасцин, протеогликан и др.
2. Также фибробласты выделяют ферменты, с помощью которых они разрушают коллаген и гиалуроновую кислоту , а затем синтезируют эти молекулы заново. Другими словами, они же являются «санитарами» дермы, непрерывно выполняя разрушение старых, отслуживших свой срок волокон (коллаген, элластин) и создание новых, в результате чего межклеточное вещество постоянно обновляется. Особенно интенсивно протекает метаболизм гиалуроновой кислоты.
3. Фибробласты вырабатывают большое количество регуляторных белков, так называемых факторов роста, которые в свою очередь ускоряют деление и рост всех типов клеток кожи, способствуют образованию новых сосудов, тем самым активизируя процессы регенерации. Вот некоторые из них:
4. Помимо всего прочего фибробласты являются основными клетками, обеспечивающими заживление ран и восстановление тканей после любых других повреждений. В момент травмы они начинают быстро делиться и выделять факторы роста, которые привлекают в очаг травмы молодые клетки эпидермиса (кератиноциты), фибробласты, фибробластоподобные клетки (мезенхимальные стволовые клетки) и другие клетки, а так же ускоряют их деление, рост, созревание и синтетическую активность, а также образование новых сосудов.
ФИБРОБЛАСТЫ ФОТО
ФИБРОБЛАСТЫ: ОСОБЕННОСТИ ПРОЦЕССА СТАРЕНИЯ
Статистика американских исследователей утверждают, что возраст, при котором человек может оставаться абсолютно здоровым, составляет 44 года для женщин (при средней продолжительности жизни 78,8 лет) и 40 лет для мужчин (при средней продолжительности жизни 72,6 года). То есть 32 - 35 последних лет каждый среднестатистический человек страдает от физической немощи угасающей жизни. Как показывают научные исследования, процесс старения начинается уже с 30 лет. Напряженный ритм современной жизни, а также стрессы отбирают много энергии и тем самым усугубляют процесс старения. Из результатов этого исследования можно сделать несколько выводов:
1. В нашем организме рука об руку одновременно идут 2 процесса обновление клеток и межклеточного вещества, а также разрушение старых, уже отслуживших клеток и компонентов межклеточного вещества. Состояние здоровье - болезнь, молодость - старость зависят от равновесия этих процессов.
2. После 30 лет интенсивность общего обмена веществ в организме человека падает, обновление клеток идет медленнее, а затем угасает совсем. Какое-то время процесс разрушения еще сохраняется, в результате чего постепенно уменьшаются объемы тканей (мышечной, жировой, костной, дермы и т.д.). Результат этого деструктивного механизма долгое время не заметен - существует заложенный от природы резерв клеток. Обратите внимание на окружающих вас людей - долгое время лет до 40 - 45 сохраняется моложавый вид, а потом очень быстро начинают проявляться и прогрессировать возрастные изменения. Недаром, существует поговорка: «До 30 лет всю ночь пьешь, гуляешь - а утром как огурчик, ничего не видно. От 30 до 40 лет всю ночь пьешь, гуляешь - а утром все на лице видно, а после 40 лет всю ночь спишь, не гуляешь - а утром на лице, как будто всю ночь пил, гулял». Хорошим образным примером являются пожилые люди - они «усыхают» и «съеживаются». Спустя некоторое время процесс разрушения останавливается. Опять устанавливается равновесие между процессами созидание - разрушение.
О ТЕРАПИИ АУТОЛОГИЧНЫМИ ФИБРОБЛАСТАМИ
Многочисленные научные исследования показали, что применение собственных (аутологичных) фибробластов
кожи способствует восстановлению физиологического баланса кожи и стимулирует естественные процессы ее обновления. Чтобы повернуть вспять процесс старения, достаточно ввести в организм немного культивированных, молодых фибробластов в виде специальных коктейлей. Содержащиеся в них клетки не только омолаживают кожу собственными силами, но и побуждают к этому остаточные фибробласты пациента, находящиеся в дерме. Те начинают активно делиться, что приводит к более интенсивному обновлению эпидермиса. Вспоминаем: ведь именно фибробласты отвечают за продукцию, организацию и обновление межклеточного матрикса дермы: коллагена, эластина, гиалуроновой кислоты и других компонентов, отвечающих за плотность, увлажненность и упругость кожи.
В результате улучшается внешний вид, повышается упругость и эластичность, сокращаются морщины и надолго замедляются процессы старения кожи. Таким образом, когда в тканях восполнена популяция функционально активных фибробластов, последующие косметологические процедуры и пластические операции будут намного более эффективными. Трансплантация культивированных аутологичных фибробластов является большим подспорьем для пластической хирургии в борьбе за молодость и долголетие.
Эффект действительно фантастический! Мелкие морщины исчезают, а крупные разглаживаются, кожа становилась упругой, эластичной и увлажненной. Меняется цвет и овал лица, великолепно подтягивается шея и молодеют руки, которые, как известно, всегда выдают возраст. После курса заметно и надолго улучшается качество кожи: она перестает быть сухой, избавляется от пигментных пятен, восстанавливает здоровый цвет, подтягивается и меняет свой рельеф за счет разглаживания мелких и средних морщин. И, конечно же, укрепляется местный иммунитет и восстанавливаются защитно-барьерные функции кожи, обеспечивается антиоксидантная защита кожных клеток, стимулируется выработка коллагена, эластина, гиалуроновой кислоты.
Другими словами время поворачивается вспять и спустя 2 - 3 месяца после начала процедур Вы расцветаете, поражая и изумляя всех вокруг, своей молодостью, красотой и свежестью. И хочется закончить словами известной всем рекламы: Вы этого достойны!
Одно из приоритетных направлений в последние 30-40 лет - это решение вопросов коррекции возрастных изменений с помощью регенеративных биотехнологий. Оно основано на способности клеток к регенерации, то есть к самостоятельному восстановлению. Точка приложения в косметологии - кожные фибробласты. Их обновление позволяет воздействовать не только на регенерацию остальных кожных клеток и структур, но и устранять различные дефекты, в том числе и возрастные морщины. Восстанавливается не просто сама кожа, но и ее молодые свойства.
Полученную таким образом кровь можно сразу высевать в культуральную среду или если количество относительно велико, то есть более 1 мл, оставляют стоять в стоячем шприце с иглой, направленной вверх, и покрывают его пластиковым протектором, до тех пор, пока осаждение клеток крови не произойдет под действием силы тяжести. Эритроциты сначала отделены от части жидкости или плазмы, в которой лейкоциты первоначально суспендированы. Через некоторое время эти клетки склонны оседать на слое эритроцитов, образуя так называемое лейкоцитарное кольцо.
Представление о фибробластах и их функции
Фибробласты - это основные клетки соединительных тканей, происходящие от стволовых клеток мезенхимы, представляющей собой зародышевую ткань человека и животных. Они имеют ядро и характеризуются разнообразной формой, в зависимости от активности: активные клетки имеют большую величину и отростки, неактивные - веретенообразную форму и меньшие размеры.
Игла затем изогнута с помощью щипцов, и несколько капель смеси лейкоцитарной плазмы инокулируют во флакон, содержащий культуральную среду. Рисунок 2 Образец крови, полученный из гибридного катетера и жалующийся на венопункт. Культуральная среда представляет собой смесь из нескольких компонентов в водной среде , такие как аминокислоты, витамины и соль, и должна быть дополнена добавлением фетальной бычьей сыворотки, антибиотики, чтобы предотвратить бактериальное загрязнение и, прежде всего, митогенная агент, наиболее часто представленный фитогемагглютинином.
Их функция заключается в синтезе межклеточного матрикса соединительной ткани. Матрикс представляет собой ее основу, которая обеспечивает транспорт химических элементов и механическую поддержку клеток. Основными компонентами матрикса являются белки гликопротеины, среди которых превалируют, протеогликаны, эластин, фибрин и другие. Фибробласты кожи расположены в ее среднем слое. Они играют значительную роль в регенерации эпителиальных клеток, продуцируя многие факторы клеточного роста (тканевые белковые гормоны):
Хотя культуральная среда может быть подготовлена исследователем в его лаборатории, культуральные среды доступны для коммерческого использования после надлежащего добавления. Важно, однако, подчеркнуть, что выбор культуральной среды, наиболее подходящей для ее предполагаемого использования, будь то для культуры лимфоцитов или для культуры фибробластов, не всегда является простой задачей, требующей экспериментальных испытаний. Фитогемагглютинин получают из бобов, и его использование в первую очередь способствует агглютинации эритроцитов, отделяя их от лейкоцитов.
- Трансформирующий (различных типов) - способствует стимулированию синтеза коллагена и эластина, формированию мелких сосудов, а также движению фагоцитов к инородному элементу.
- Эпидермальный, ускоряющий разрастание тканей путем клеточного деления и перемещение кератиноцитов, синтезирующих кератин (пигмент).
- Основной - усиливает рост всех кожных клеток, выработку фибронектина, участвующего в защитных реакциях организма, коллагена и эластина.
- Фактор роста кератиноцитов, который способствует эпителизации и заживлению поврежденных участков кожи.
Лимфоциты, которые обычно дифференцируются в циркулирующей крови, возвращаются к лимфобластному. Как таковые, они могут размножаться один или два раза в течение 72 часов. Таким образом, это означает среднее время, указанное для содержания культур в теплице, независимо от позвоночных, хотя в конечном итоге могут быть использованы более длительные периоды. В литературе можно найти очень полезную информацию о культуральной среде, а также лучшие времена и температуры инкубации, рекомендуемые для каждой группы позвоночных.
Следующие этапы получения хромосомных препаратов состоят, как уже подчеркивалось, в лечении колхицином, продолжительность которого, а также концентрация лекарственного средства в культуральной среде могут быть переменными при гипотоническом лечении и фиксации клеток. Культуры лимфоцитов также называют кратковременными культурами, в отличие от тех, которые получены из биопсий твердых тканей, которые считаются долговечными, поскольку процесс от посадки эксплантов до создания так называемой первичной культуры и доступность клеток для первых хромосомных препаратов занимает определенное количество времени, обычно не менее 10 дней.
Фибробласты вырабатывают и продуцируют также белки:
- тинасцин, участвующий в регулировании нормального распределения коллагена и эластина в ткани;
- нидоген и ламинин (пептиды, входящие в состав базальной мембраны кожи и являющиеся для нее строительным материалом);
- протеогликаны, которые играют роль во взаимодействии клеток и другие.
Под влиянием свободных радикалов и других факторов происходит старение коллагеновых и эластиновых волокон, которые подвергаются дальнейшему расщеплению коллагеназой (вырабатывается теми же фибробластами) и эластазой на составные элементы. Их молекулы используются фибробластами для новой выработки предшественников коллагена и эластина
В общем, первый шаг - получить образец ткани, который может быть от биопсии кожи, достаточно глубоко, чтобы охватить область дермы. Для некоторых позвоночных может быть выполнена биопсия уха, крыла или хвоста, но не исключены фрагменты органа, такие как почка, печень, селезенка и легкое. Твердая тканевая культура, также называемая культурой фибробластов, требует полных условий асептики с момента закупки материалов, что должно быть сделано после точной очистки области животного, из которого будет выполняться биопсия.
Образец ткани помещают в стерильные флаконы, содержащие солевой раствор Хэнкса и антибиотик. Рекомендуется хранить материал примерно на 24 часа, слегка охлажденный в холодильнике или даже при комнатной температуре, чтобы исключить возможное загрязнение перед посевом. Биопсии часто выполняются на местах или в местах, удаленных от лаборатории исследователя, но поскольку они правильно хранятся и транспортируются, их можно без труда использовать в культуре клеток. Чтобы инициировать культуру, образец ткани разрушается ферментативной обработкой, и клеточная суспензия помещается в подходящий сосуд для культивирования.
Таким образом, функция фибробластов заключается в участии в едином замкнутом процессе разрушения-регенерации клеток и волокон.
Использование фибробластов в косметологии
Возрастные изменения тканей организма
Старение тканей - это закономерный биологический системный процесс, который начинается с 25-30 лет и затрагивает все клетки, в том числе и кожи. Одной из основных причин является снижение способности фибробластов в плане активного синтеза и пролиферации в тканях кожи, в результате чего происходит снижение содержания их главных компонентов - гиалуроновой кислоты , коллагена, эластина, сосудистой сети.
Другая альтернатива - вырезать ткань на мелкие фрагменты, распределить их. По поверхности колбы, и в этом случае эксплантаты удаляются только тогда, когда из них возникают фибробласты. Через несколько дней в теплице и ежедневном контроле условий культуральной среды фибробласты умножаются на всю свободную поверхность сосудов для культивирования. Таким образом, они образуют монослой клеток, культура готова пройти первую трипсинизацию, то есть отделение клеток и подсадки новых судов, так что число выборок достаточно велико не только для будущих препаратов хромосомных, такие как так что в ячеистом банке есть ячейки для хранения в жидком азоте.
Это отражается на внешнем виде кожного покрова. Он истончается, становится сухой, бледнеет, происходит снижение степени эластичности и упругости, замедляется восстановление жирового барьера, образуются сети мелких морщин, которые постепенно углубляются, происходит птоз кожи и формирование складок. В то же время функции катаболического (разрушительного) характера еще длительное время остаются на прежнем уровне. Ответственны за все эти изменения в основном клетки фибробласты, являющиеся одним из главных компонентов дермы. В возрасте после 30 лет их количество снижается в геометрической прогрессии каждые 10 лет на 10-15%.
Чтобы хранить клетки, образцы суспензии помещают в криогенные флаконы и, при необходимости, культуру клеток можно возобновить еще долго после. Указанное время получения хромосомных препаратов составляет около 24 часов после установления субкультур, так как оно соответствует первой волне делений клеток, которые происходят независимо от любого другого типа стимула. Колхицин затем инокулируют в культуру, а затем обрабатывают другие стадии, то есть гипотонизацию и фиксацию, необходимые для получения хромосомных препаратов.
Культура фибробластов, несомненно, является очень выгодной процедурой при работе с цитогенетикой позвоночных, особенно когда доступ к живому животному каким-то образом затруднен. Важно помнить, что для культуры фибробластов, выполняющего соответствующие физические объекты должны ламинарный поток быть асептической среде, такое оборудование, как, например, инвертированный микроскоп для контроля пролиферации клеток на поверхности культурального сосуда не всегда доступен в цитогенетических лабораториях.
Эти процессы протекают неравномерно в различных зонах кожной поверхности тела. Больше всего возрастным изменениям подвержены открытые участки и места сгибов - лицо, шея, верхние отделы грудной клетки по передней поверхности (зона «декольте»), кисти, кожа в области локтевых и лучезапястных суставов.
Биоинженерия в косметологии
Сегодня, благодаря успехам биотехнологии, появилась возможность естественным путем повлиять непосредственно на причину возрастного увядания кожных тканей. Этого удалось достигнуть способом обогащения ее собственными молодыми фибробластами, которые являются строителями внеклеточного матрикса.
Вы находите содержание этой книги интересным? Наслаждайтесь и получите свою копию сейчас. Новообразования по эволюции классифицируются как доброкачественные и злокачественные. Доброкачественные новообразования производят только локальные изменения, как правило, механического порядка, как в лейомиоме матки. В них смерть редко встречается, хотя в зависимости от топографических или функциональных факторов самого новообразования они могут быть летальными. Примеры: менингиома при сжатии головного мозга, паратиреоидная аденома гиперкальцемией.
Трансплантация в кожу лица собственных молодых клеток фибробластов способна эффективно и достаточно быстро активизировать процессы обновления и восстановления ее структуры. Результатом является улучшение цвета лица, гидратации, эластичности и тургора тканей, исчезновение мелких рубчиков, образовавшихся в результате различных кожных заболеваний, уменьшение количества и глубины морщин.
Злокачественные новообразования вызывают локальное разрушение, разрушение в отдаленных местах и общие нарушения обмена веществ. Они вызывают смерть, если к ним не относятся должным образом и в нужное время. Злокачественные новообразования в совокупности называют раком. Они являются второй причиной смертности в Чили после сердечно-сосудистых заболеваний.
Общие характеристики доброкачественных новообразований
Макроскопический и микроскопический аспект позволяет в большинстве случаев выводить, является ли новообразование доброкачественным или злокачественным.
Общие характеристики злокачественных опухолей
При злокачественных новообразованиях кожных или слизистых поверхностей некроз вызывает язвы.Преимуществом клеточного омоложения является и то, что трансплантированные фибробласты долгое время (от полугода до полутора лет) сохраняют функциональную активность в части усиленного синтеза гиалуроновой кислоты, коллагена, эластина и других компонентов матриксной системы кожи. В течение этого срока постоянно продолжается улучшение ее состояния.
Плохое разграничение, нерегулярное в соответствии с относительным сопротивлением различных тканей к инвазии: свободная соединительная ткань и просвет малых лимфатических сосудов мало сопротивляются инвазии; Артериальные стенки, кость и хрящ предлагают большую устойчивость, но их также можно вторгаться.
Вторжение было изучено лучше при злокачественных эпителиальных новообразованиях. Было установлено, что инвазия имеет критическое фазовое проникновение в основную мембрану. Были определены три этапа. Другие молекулы представляют собой интегрины, которые, связываясь с фибронектином, будут, например, ориентировать компоненты цитоскелета, изменяя форму клетки.
Клетки для трансплантации получают из кусочка кожи диаметром 3-5 мм, взятого из заушной или пупочной области, где кожа меньше всего подвержена воздействию ультрафиолетового облучения. Биоптат подвергается исследованию и специальной обработке с целью культивирования молодых фибробластов в лабораторных условиях в течение 1 месяца, после чего с помощью инъекций вводится в необходимые зоны. Аутологичные (свои) клетки не воспринимаются собственной иммунной системой как антиген (чужеродные) и, следовательно, организмом не отторгаются, а полноценно функционируют.
Неопластические клетки продуцируют три типа протеаз: сериновые протеиназы, цистеиновые протеиназы и металлопротеазы. Металлопротеиназы могут быть секретированы опухолью или чаще стромальными фибробластами при стимуляции самих опухолевых клеток. Эти же клетки секретируют ингибиторы металлопротеиназ, которые инактивируют как профермент, так и активный фермент таким образом, что протеолиз является следствием баланса между обоими действиями. Неопластические клетки продуцируют аутокринный фактор моторики, который индуцирует псевдоподии, богатые рецепторами для ламинина и фибронектина.
Нередко уже после первой процедуры аутотрансплантации наступает заметное улучшение состояния кожи, а через две недели после окончания курса процедур сами пациенты уже замечают значительное улучшение тона и контуров лица, повышение тургора и толщины кожи, уменьшение числа морщин и их глубины. Через полгода после трансплантации клеток в коже определяются их группы на фоне увеличившегося количества волокон коллагена. В течение полугода глубина морщин вокруг глаз уменьшается в среднем на 90%, в зонах «декольте» и шеи- на 95%, щек - на 87%, вокруг рта - на 55%.
Выявлены хемотаксические и гаптотактические факторы, которые увеличивают подвижность клеток. Клетки перемещаются в амебоидной форме, подобной лейкоцитам. Молекулярные механизмы, контролирующие подвижность и биохимический контроль сборки цитоскелета, неизвестны. Оттуда он может продолжаться через лимфатические сосуды и распространяться на ганглии или отдаленные органы. Частным примером является диффузное лимфатическое проникновение легкого или карциноматозного лимфангиоза, при котором междольковые легочные перегородки появляются увеличенными, а плевра проявляет очень заметную молочную сетчатку из-за утолщения лимфатических сосудов.
Введение полученного материала в дерму осуществляется тоннельным способом под местной анестезией посредством нанесения крема с анестетиками на кожу. Курс лечения состоит из 2-х процедур с интервалом 1-1,5 месяца. После введения фибробластов они распределяются в дермальном слое небольшими группами и не подвержены митотическому делению, что исключает процессы перерождения их в опухолевые клетки.
Примеры: портальная вена при раке печени, нижняя кава при раке почки. Несмотря на то, что они сходны с тканями происхождения, те, которые имеют злокачественную опухоль, представляют собой вариации. Эти вариации встречаются в паренхимных клетках одного и того же новообразования и в клетках разных новообразований того же типа. Подобно тому, как неоплазия представляет собой карикатуру на оригинальную ткань, ее клетки являются карикатурой на нормальные клетки.
Персонажи клеточной гетеротипии
Ячейка в целом показывает анизоцитоз или изменения размеров. Цитоплазма, как правило, более редкая и базофильная, иногда обильная и с ненормальной дифференциацией. В некоторых раках молекулы, которые обычно обнаруживаются только в эмбриональной или плодовой жизни, появляются в цитоплазме.
Препараты для трансплантации проходят лабораторный контроль на предмет биологической безопасности и жизнеспособности клеток. Методика аутотрансплантации фибробластов в косметологии получила официальное разрешение Росздравнадзора.
Современная косметология располагает целым спектром техник и методик, способных существенно омолодить кожу лица. Стоит, правда, отметить, что почти все ныне существующие методы способны омолаживать кожу лишь на время, совершенно не влияя на биологические процессы, происходящие в клетках. Но мы знаем, что старение начинается на клеточном уровне и разумно воздействовать именно на клетки, чтоб обратить этот процесс вспять. Поэтому в косметологии существуют регенеративные технологии, которые опираются на инволюционные биотехнологии. Главным инструментом регенеративных технологий являются фибробласты.
Ядро вообще уникально, иногда двойное или множественное. Показывает анизокариоз или переменные размеры, полиморфизм или округлые до крайне нерегулярных ядер. Ядерная граница нерегулярно распилена или сгибается, и часто возникает гиперхромазия, то есть хроматин в зернах или грубых комках, прикрепленных к ядерной границе.
Ядро является однократным и увеличивается по размеру и нерегулярно. Митотические фигуры могут быть аномальными с триполярными или тетраполярными веретенами или с анархической дисперсией хромосом. Изменения, описанные как компоненты гетеротипии, могут быть сгруппированы в две группы: одна из анаплазии; другой, который мы можем назвать чудовищем.
ВАЖНО!
Фибробласты – это клетки соединительной ткани, которые синтезируют межклеточный матрикс. Фибробласты выделяют предшественников коллагена и эластина, а также гликозаминогликанов, самая известная из которых – гиалуроновая кислота. Фибробласты являются зародышевой тканью как у человека, так и у животных. Фибробласты имеют разнообразную форму, в зависимости от местонахождения в организме и от уровня своей активности. Слово «фибробласты произошли от латинского корня «фибра» – волокно и греческого «бластос» – зародыш.
Функции фибробластов
Основная роль фибробластов в организме – синтез компонентов внеклеточного матрикса:
- белков (коллагена и эластина), которые образуют фиброволокна;
- мукополисахаридов (аморфное вещество).
В коже фибробласты отвечают за процесс ее восстановления и обновления. Они синтезируют коллаген и эластин – основной каркас кожи и гиалуроновую кислоту, связывающую в тканях воду. Другими словами, именно фибробласты являются генераторами молодости и красоты нашей кожи. С годами число фибробластов уменьшает, а оставшиеся фибробласты теряют свою активность. По этой причине темпы регенерации кожных покровов снижаются, коллаген и эластин теряют свою упорядоченную структуру, в результате чего появляется больше поврежденных волокон, неспособных выполнять свои прямые функции. В итоге, наступает возрастное увядание кожи: дряблость, сухость, потеря объемов и появление морщин.
Под влиянием Уф-излучения в коже образуются свободные радикалы, разрушающие коллагеновые и эластические волокна. Но не только свободные радикалы разрушают коллаген и эластин. В процессе разрушения коллагена и эластина также задействованы ферменты коллагеназа и эластаза, которые тоже синтезируются фибробластами. Ферменты расщепляют волокна белков на основные компоненты, из которых затем фибробласты вырабатывают предшественников коллагена и эластина.
Можно сказать, что фибробласты играют ключевую роль в процессе круговорота деградации и синтеза клеток и волокон.
Еще раз назовем основные функции фибробластов в организме:
- способствуют эпителизации и заживлению поврежденной кожи за счет стимуляции кератиноцитов;
- ускоряют пролиферацию и дифференцировку клеток;
- играют большую роль в заживлении ран, способствуют перемещению фагоцитов;
- синтезируют коллаген, эластин и гиалуроновую кислоту;
- участвуют в процессах регенерации и обновления кожных покровов.
Как активизировать фибробласты?
Выше мы узнали, каковы причины старения организма, и какую роль в этом процессе играют фибробласты. И тут рождается вполне закономерный вопрос: как активизировать фибробласты? Ведь с возрастом их количество не просто снижается, даже если количество фибробластов остается прежним, они становятся пассивными и полностью теряют свою активность. Задача регенеративных биотехнологий найти способы воздействия на фибробласты, чтоб заставить их «вспомнить молодость». Есть ли успехи в этом направлении? С уверенностью можно сказать, что да.
Восполнение в кожи белков молодости – коллагена и эластина – инъекционным методом не дает надежных результатов омоложения. Они способны улучшить характеристики кожи лишь на некоторое время. То есть состояние кожи становится лучше, но процесс старения не приостановлен, биологические часы неумолимо идут вперед. И через некоторое время, после деградации коллагена, эластина и гиалуроновой кислоты, состояние кожи оставляет желать лучшего.
Лучшее средство омоложения – это наша естественная система обновления и регенерации. Стимуляция собственных ресурсов организма – вот ключ к нашей молодости. На данный момент существуют регенеративные биотехнологии, способные действительно омолодить организм. Главенствующая роль в этих методиках отводится фибробластам.
Современные регенеративные технологии
В основе современных регенеративных технологий стоит принцип стимуляции аутологичных дермальных фибробластов. Суть этих технологий заключается в пополнении популяции фибробластов молодыми и активными клетками. Этот метод называется SPRS-терапия, что буквально обозначает service for personal regeneration of skin (сервис для индивидуального восстановления кожи).
Как же это происходит? Из кусочка кожи путем определенных лабораторных манипуляций выделяют фибробласты. Отбору и стимуляции подвергаются только молодые и активные фибробласты. Затем их популяция в течение некоторого времени доводится до нужных объемов, и они готовы для внедрения в организм. При внедрении аутологичных (собственных) фибробластов не наблюдается отторжений и аллергических реакций, так как в организм поступают свои собственные клетки. Новые фибробласты способны регенерировать кожные покровы в течение двух лет и даже больше. Результат заметен сразу же после первого сеанса клеточной терапии. Происходит заметное улучшение кожных покровов: исчезает дряблость и сухость, улучшается цвет лица и структура кожи, полностью исчезают мелкие морщины, а глубокие становятся менее заметными.
Фибробласты, стволовые клетки и онкогенез
Многие пациенты отождествляют фибробласты со стволовыми клетками. Поэтому часто задают вопрос, не являются ли фибробласты стволовыми клетками? Нет, нет и еще раз нет. Фибробласты не имеют никакого отношения к стволовым клеткам, использование которых, к слову сказать, запрещено во всем мире. Фибробласты относятся к зрелым, специализированным для определенной ткани клеткам. Они способны превратиться только в фиброциты. Фиброциты – это тоже клетки соединительной ткани, которые не способны делиться. Стволовые клетки – это незрелые, недифференцированные клетки, которые могут дать начало нескольким типам клетки и из которых можно вырастить любую ткань нашего организма.
СТРОЙНАЯ ФИГУРА!
Другой вопрос, часто задаваемый пациентами, способны ли аутологичные фибробласты переродиться в опухолевые клетки? Это совершенно невозможно. Фибробласты не способны переродится в злокачественные клетки, потому что они не поддаются непрямому делению клеток (митозу). Они запрограммированы на определенное количество делений, после чего погибают, а их место занимают новые клетки. После внедрения в кожу фибробласты не делятся, но продолжительное время вырабатывают необходимые вещества, способствующие регенерации и омоложению кожи. Таким образом, они остаются совершенно безопасными аутологичными фибробластами как в процессе культивирования в лаборатории, так и в процессе внедрения в организм.
Культивированные аутологичные фибробласты подвергаются строгому контролю на предмет биологической безопасности и жизнеспособности клеток.
Вы – одна из тех миллионов женщин, которые борются с лишним весом?
А все ваши попытки похудеть не увенчались успехом?
И вы уже задумывались о радикальных мерах? Оно и понятно, ведь стройная фигура - это показатель здоровья и повод для гордости. Кроме того, это как минимум долголетие человека. А то, что человек, теряющий «лишние килограммы» , выглядит моложе – аксиома не требующая доказательств.
Фибробласты - ведущие клетки рыхлой соединительной ткани, продуцирующие компоненты межклеточного вещества. Это отростчатые, веретенообразные или распластанные клетки размером около 20 мкм. В них хорошо развиты органеллы внутренней метаболической среды. Ядро фибробласта овальной формы, содержит равномерно распыленный хроматин и 2-3 ядрышка. Цитоплазма отчетливо подразделяется на интенсивно окрашенную эндоплазму и слабо окрашенную эктоплазму. Цитоплазма фибробластов (особенно молодых) базофильна. В ней выявляется хорошо развитая эндоплазматическая сеть с большим количеством рибосом, прикрепленных к мембранам в виде цепочек по 10-30 гранул. Такая ультраструктура гранулярной эндоплазматической сети характерна для клеток, активно синтезирующих белок "на экспорт". Имеются также многочисленные свободные рибосомы, хорошо развитый комплекс Гольджи. Митохондрии - крупные, количество их невелико. Цитохимическими методами показано наличие в цитоплазме фибробластов ферментов гликолиза и гидролитических ферментов лизосом (особенно - коллагеназы). Менее активны окислительные ферменты митохондрии.
Опорно-двигательная система клетки обеспечивает их подвижность, изменение формы, прикрепление к субстрату, механическое натяжение пленки, к которой клетка прикрепляется в культуре. На клеточной поверхности имеется много микроворсинок и пузырчатых выростов. Фибробласты во взвешенном состоянии в жидкой среде имеют шаровидную форму. Распластанным фибробласт становится после прилипания к твердой поверхности, по которой он передвигается за счет псевдоподий.
Основная функция фибробластов - синтез и секреция белков и гликозаминогликанов, идущих на формирование компонентов межклеточного вещества соединительной ткани, а также выработка и секреция колониестимулирующих факторов (грану-лоцитов, макрофагов). Фибробласты долгое время сохраняют способность к пролиферации. Фибробласты, закончившие цикл развития, называются фиброцитами. Это долгоживущие клетки. Цитоплазма клеток обедняется органеллами, клетка уплощается, пролиферативный потенциал падает. Однако клетка не теряет способность участвовать в регуляции обменных процессов в ткани.
Межклеточное вещество . Состоит из фибриллярного и основного (аморфного) компонентов. Методами гистоавторадиографии с введением меченых аминокислот (3Н-пролин, 3Н-глицин и др.) установлено, что в полисомах фибробластов происходит синтез молекул белка. Фибробласты одновременно могут синтезировать несколько типов специфических белков и гликозаминогликаны. Для синтеза белка коллагена имеет существенное значение наличие витамина С, при недостатке которого коллагеногенез резко тормозится. Интенсивнее идет синтез межклеточного вещества в условиях пониженной концентрации кислорода. Одновременно с синтезом коллагена фибробласт разрушает примерно 2/3 этого белка с помощью фермента коллагеназы, что препятствует преждевременному склерозированию ткани.
Синтезированные молекулы проколлагена
выводятся на поверхность фибробластов путем экзоцитоза. При этом осуществляется переход белка из растворимой формы в нерастворимую - тропоколлаген. Объединение молекул тропоколлагена в надмолекулярные структуры - коллагеновые фибриллы - происходит в непосредственной близости от клеточной поверхности благодаря действию особых веществ, выделяемых клеткой. В частности, на поверхности фибробластов обнаружен белок - фибронектин, выполняющий адгезивную и другие функции. Последующие этапы фибриллогенеза происходят путем полимеризации и агрегации тропоколлагена на ранее образованных фибриллах. При этом созревание коллагеновых волокон может протекать и без прямой связи с фибробластами.
Гликозаминогликаны
являются регуляторами коллагенообразования и входят в состав основного (аморфного) компонента межклеточного вещества.
Фибриллярный компонент межклеточного вещества рыхлой соединительной ткани включает три типа волокон - коллагеновые, эластические и ретикулярные. Они имеют сходный механизм образования, однако отличаются друг от друга по химическому составу, ультраструктуре и физическим свойствам. Белок коллаген идентифицируется по аминокислотному составу и последовательности расположения аминокислот в молекуле коллагена. В зависимости от вариации аминокислот в полипептидной цепи, иммунных свойств, молекулярной массы и др. различают 14 и более разновидностей коллагеновых белков, которые входят в состав соединительной ткани органов. Все они составляют 4 основных типа, или класса, коллагена.
Коллаген 1-го типа встречается в соединительной и костной тканях, а также в склере и роговице глаза; II-го типа - в хрящевых тканях; III-го типа - в стенке кровеносных сосудов, в соединительной ткани кожи плода; IV-ro типа - в базальных мембранах.