Вич 1 2 антиген антитела положительный. Антитела к вич, на что они указывают. Результаты ИФА на примере сифилиса

ИФА (иммуноферментный анализ, ELISA – англ.) вошел в жизнь практической медицины еще где-то в 60-х прошлого столетия. Первоначальной его задачей были гистологические исследования в научных целях, которые сводились к поиску и идентификации антигенной структуры клеток живого организма.

В основе метода ИФА лежит взаимодействие специфических (АТ) и родственных антигенов (АГ) с образованием комплекса «антиген – антитело» , который выявляют при помощи фермента. Этот факт натолкнул ученых на мысль, что метод может быть использован в диагностических целях для выявления специфических иммуноглобулинов различных классов, участвующих в иммунном ответе на ту или иную инфекцию. И это был прорыв в клинической лабораторной диагностике!

Активно использоваться метод начал только в начале 80-х и то, в основном, в специализированных учреждениях. Первыми иммуноферментными анализаторами были снабжены центры и станции переливания крови, инфекционные и венерологические стационары, поскольку рожденный на африканском континенте, появившийся на горизонте у нас и тут же примкнувший к «старым» инфекциям грозный СПИД, требовал незамедлительных мер диагностики и поиска лечебных препаратов, воздействующих на него.

Область применения метода ИФА

Возможности иммуноферментного анализа поистине обширны. Теперь и представить себе трудно, как можно обойтись без подобных исследований, применяемых буквально во всех отраслях медицины. Кажется, что может сделать ИФА в онкологии? Оказывается, может. И многое. Способность анализа находить маркеры, свойственные некоторым видам злокачественных новообразований, лежит в основе раннего выявления опухоли, когда другим способом она еще не определяется из-за своих небольших размеров.

Современная клиническая лабораторная диагностика (КДЛ), кроме онкомаркеров, располагает значительным арсеналом панелей для ИФА и использует их для диагностики различных патологических состояний (инфекционных процессов, гормональных нарушений) и мониторинга фармацевтических лечебных препаратов с целью выявления их влияния на организм больного и, кстати, не только человека. В настоящее время иммуноферментный анализ широко используется и в ветеринарной службе, ведь «братья наши меньшие» тоже подвержены многим заболеваниям, от которых, порой, очень сильно страдают.

Таким образом, ИФА, благодаря своей чувствительности и специфичности, по образцу крови, взятому из вены, может определить:

Гормональный статус (гормоны щитовидной железы и надпочечников, половые гормоны);
Присутствие вирусной и бактериальной инфекции (ВИЧ, В и С, хламидиоз, сифилис, и , и , а также многие другие болезни, вызванные патогенными микроорганизмами);
Следы жизнедеятельности микроорганизмов, возбудивших инфекционный процесс, который благополучно закончился и перешел в стадию формирования иммунного ответа на этот возбудитель. Такие следы, то есть, антитела, во многих случаях остаются циркулировать в крови пожизненно, чем защищают человека от повторного заражения.

В чем суть ИФА?

Иммуноферментный метод, позволяет определить не только присутствие самого возбудителя (качественный анализ), но и его количественное содержание в сыворотке крови больного.

Вирусовая или бактериальная доза существенно влияет на течение инфекционного процесса и его исход, поэтому количественному анализу отведена не последняя роль в диагностике и лечении заболеваний в различных формах и стадиях.

Однако зная иммуноферментные исследования, как метод ИФА, мы даже не задумываемся, как же ему удается охватить такой широкий круг микроорганизмов, населяющих нашу планету, многие из которых несут прямую угрозу здоровью и жизни человека и животных. А дело в том, что ИФА имеет много вариантов (неконкурентный и конкурентный – прямой и непрямой), каждый из которых решает свою задачу и, таким образом, позволяет проводить целенаправленный поиск.

Для выявления иммуноглобулинов того или иного класса используется традиционная 96-луночная полистироловая панель (планшет), в лунках которой в твердой фазе сосредоточены сорбированные рекомбинантные белки. Попавшие в лунку с сывороткой крови антитела или антигены, находят «знакомый» объект и образуют с ним комплекс (АГ – АТ), который, закрепившись ферментным конъюгатом, при считывании результатов проявится изменением окраски лунки.

Иммуноферментный анализ проводится на тест-системах определенной специфичности, изготовленных в специальных лабораториях и укомплектованными всеми необходимыми реагирующими компонентами. Исследования можно проводить с помощью промывных аппаратов («вошеров») и считывающих спектрофотометров, где большей частью задействован ручной труд. На полных автоматах, освобождающих лаборанта от монотонного закапывания, промывания и прочих рутинных дел, конечно, работать быстрее и удобнее, но не все лаборатории могут позволить себе такую роскошь и продолжают работать по старинке – на полуавтоматах.

Интерпретация результатов ИФА находится в компетенции врача лабораторной диагностики, при этом обязательно берется в расчет и присущее практически всем иммунохимическим реакциям свойство давать ложноположительные или ложноотрицательные ответы.

Видео: современное проведение иммуноферментного анализа

Результаты ИФА на примере сифилиса

Иммуноферментный анализ подходит для выявления всех форм , а, кроме этого, применяется в проведении скрининговых исследований. Для проведения анализа используют венозную кровь пациента, взятую натощак. В работе используются планшеты с определенной специфичностью (АТ классов А, М, G) или суммарные антитела.

Учитывая то, что АТ при сифилисе продуцируются в конкретной последовательности, ИФА может легко ответить на вопрос, когда произошло заражение и в какой стадии находится процесс, а расшифровка полученных результатов может быть представлена в следующем виде:

IgM указывают на продолжительность инфекционного процесса (могут появляться при обострении хронических воспалительных заболеваний);
IgA констатируют, что заражение случилось более месяца назад;
IgG свидетельствуют о том, что инфекция находится в самом разгаре или о проведенном недавно лечении, что легко выясняется при сборе анамнеза.

При проведении анализа на сифилис, лунки с отрицательным ответом (и отрицательный контроль) останутся бесцветными, в то время как положительный результат (как и положительный контроль) даст ярко-желтое окрашивание за счет изменения цвета хромогена, добавленного в ходе исследования. Однако интенсивность окраски не всегда совпадает с контролем, то есть, она может быть немного бледнее или слегка желтоватой. Это сомнительные результаты, которые, как правило, подлежат повторному исследованию с обязательным учетом количественных показателей, полученных на спектрофотометре, но в целом, окраска находится в прямо пропорциональной зависимости от количества иммунных комплексов (связанные между собой АГ и АТ).

Самый волнительный из иммуноферментных анализов – ИФА на ВИЧ

Анализ на , пожалуй, больше других интересен широкому кругу населения, ведь пока нельзя с уверенностью утверждать, что исчезли многие социальные проблемы (проституция, наркомания и др.). К сожалению, ВИЧ затрагивает не только эти слои человеческого общества, заразиться можно при различных обстоятельствах, не связанных с половой распущенностью или приемом наркотиков. Но коль возникла необходимость обследования на ВИЧ, то бояться не следует, что все вокруг узнают о посещении такой лаборатории. Сейчас ВИЧ-инфицированные люди защищены законом, а сомневающиеся могут обратиться в анонимные кабинеты, где можно решить проблему, не боясь огласки и осуждения.

Иммуноферментный метод, применяемый для диагностики ВИЧ инфекции, относится к первостепенным стандартным исследованиям, которые, однако, требуют особых условий, поскольку тема очень деликатная.

ИФА на ВИЧ имеет смысл проводить после полового контакта, переливания крови, других медицинских манипуляций , предполагающих заражение, и по окончании инкубационного периода («серонегативное окно»), но следует учитывать, что этот промежуток времени не является постоянным. Он может закончиться через 14-30 дней, а может продолжаться до полугода, поэтому средним значением принято считать интервал от 45 до 90 дней. На ВИЧ кровь сдают так же, как и на другие инфекции – из вены на голодный желудок. Результаты будут готовы в зависимости от накопления материала в лаборатории и ее загруженности (от 2 до 10 дней), хотя чаще всего лаборатории обеспечивают получение ответа в тот же день или на следующий.

Что можно ожидать от результатов на ВИЧ?

ИФА на ВИЧ-инфекцию определяет антитела к двум разновидностям вируса: ВИЧ-1 (более распространенный в России и других странах Европы и Азии) и ВИЧ-2 (встречающийся чаще на территории Западной Африки).

Задачей ИФА ВИЧ является поиск АТ класса G, которые выявляются на всех тест-системах, но в более позднем периоде, и АТ классов А и М, выявляемых на рекомбинантных тест-наборах нового поколения, позволяющих найти антитела на самых ранних стадиях (инкубационный период – «серонегативное окно»). От ИФА можно ожидать следующие варианты ответов:

Первичный положительный результат: кровь подлежит перепроверке на тест-системе такого же типа, но по возможности другой серии и другим человеком (лаборантом);
Повторный (+) предполагает новый забор крови у пациента с исследованием ее подобно первичному анализу;
Очередной положительный результат подлежит референтному анализу, при котором используются высокоспецифичные тест-наборы (2-3 шт.);
Положительный результат в обеих (или в трех) системах направляется на иммуноблотинг (тот же ИФА, но выполненный в индивидуальном порядке на тест наборах особо высокой специфичности).

Заключение о ВИЧ инфицировании выносится только на основании иммуноблотинга. Проводится беседа с инфицированным в условиях полной конфиденциальности. Разглашение медицинской тайны в России, как, впрочем, и в других странах, подлежит уголовному наказанию.

Анализы на хламидии и цитомегаловирус иммуноферментным методом также обрели особую популярность, ввиду того, что позволяют определить время заражения, стадию заболевания и эффективность лечебных мероприятий.

При внедрении тоже можно наблюдать появление антител различных классов в разных фазах патологического состояния, вызванного инфекционным агентом:

IgM могут обнаружиться уже дней через семь после заражения;
IgA говорят о том, что инфекция в организме живет уже более месяца;
IgG подтверждают диагноз хламидиоза, помогает следить за лечением и определить его действенность. Следует заметить, что антитела класса G остаются и циркулируют в организме независимо от давности болезни, поэтому для правильной расшифровки анализа нужно принимать во внимание референтные значения (нормы), которые, кстати, для каждой КДЛ свои: с учетом марки тест-системы и специфичности реагентов, входящих в набор. Значения нормы вписываются в бланк рядом с результатом ИФА.

Что касается , то здесь несколько иначе: антитела класса М появляются приблизительно через месяц-полтора, то есть, положительным результат (IgM+) становится в фазе первичного инфицирования или при реактивации скрытой инфекции и остается таковым от 4 месяцев до полугода.

Наличие АТ класса G характерно для начала первичной острой инфекции или реинфекции. Анализ констатирует, что вирус имеет место, однако информации, в какой стадии находится инфекционный процесс – не дает. Между тем, определение нормы титра IgG тоже вызывает затруднения, так как она целиком зависит от иммунного статуса конкретного человека, который, впрочем, устанавливается выявлением иммуноглобулинов класса G. Учитывая такое поведение антител, при диагностике ЦМВИ возникает необходимость в оценке способностей антител класса G взаимодействовать с ЦМВ, чтобы потом «обезвредить» его (авидность АТ). На начальном этапе болезни IgG очень плохо связываются с антигенами вируса (низкая авидность) и лишь потом начинают проявлять активность, стало быть, можно говорить о повышении авидности антител.

О достоинствах иммуноферментного анализа можно говорить долго и много, ведь этот метод сумел решить многие диагностические задачи, используя лишь венозную кровь. Не нужно долгих ожиданий, волнений и проблем с забором материала для исследования. К тому же тест-системы для ИФА продолжают совершенствоваться и не за горами тот день, когда тест выдаст 100% достоверность результата.

Видео: учебный фильм МГМУ им. Сеченова об основах ИФА

Где проводится: Тонус

Срок выполнения: 3-5 рабочих дней

+ Забор материала 200 руб.

+ Забор анализа на дому у взрослого (только Нижний Новгород) 200 руб.

Описание Подготовка Показания Интерпретация результатов

ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) принадлежит к семейству ретровирусов и вызывает заболевание — ВИЧ инфекцию, а на конечном этапе — СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита). Вирус поражает преимущественно клетки иммунной системы хозяина, а именно Т-лимфоциты, имеющие CD4 — рецепторы.

Генетический материал вируса интегрируется с геномом клеток хозяина, и клетка начинает синтез различных частей вируса для его дальнейшей сборки. На поверхности пораженной клетки появляются антигены вируса, к которым в организме происходит выработка антител, которые и выявляет анализ крови на ВИЧ.

Таким образом, ВИЧ сильно подавляет функцию иммунной системы и бактерии, которые у здорового человека в норме не приносят ему вреда, у пациента с ВИЧ вызывают тяжелые заболевания. Кроме того, для ВИЧ характерно появление злокачественных опухолей.

Анализ на ВИЧ следует сдавать не ранее 3-6 недель после предполагаемого заражения, так как только в это время начинают вырабатываться антитела к вирусным антигенам. После 3 месяцев анализ крови на ВИЧ почти всегда способен выявить заражение вирусом. Только в некоторых случаях их антитела можно обнаружить спустя многие месяцы. В стадии СПИД количество антител снижается из-за гибели иммунных клеток. В редчайших случаях антитела в анализе на ВИЧ могут не определятся.

Очень важно вовремя сдать анализ на ВИЧ, ведь без лечения прогноз у пациента неутешительный — в среднем около 10 лет, но при проведении своевременной терапии пациент сможет прожить до 70 -80 лет. Вакцины от ВИЧ на сегодняшний день не существует.

Инфицирование ВИЧ может происходить при переливании крови (наибольшая вероятность заражения), инфицирование ребенка во время беременности и родов (передача вируса от больной матери), при сексуальных контактах (вагинальных, анальных, оральных), через загрязненные медицинские инструменты и т.п.

Наибольшая концентрация ВИЧ в крови, сперме, секрете шейки матки. В меньших количествах он выделяется с материнским молоком, мочой, слюной, слезами и поэтому не существует опасности заражения через поцелуи, во время бытовых контактов, через воду и пищу. Чаще всего наблюдается заражение половым путем (во время незащищенного полового акта), при контакте с кровью (при переливании крови, использовании нестерильных медицинских инструментов, при введении наркотиков, приготовленных с использованием крови) и от ВИЧ-инфицированной матери (во время беременности, родов или кормления грудью).

Вероятность заражения зависит от состояния кожных покровов, слизистых рта и прямой кишки, количества вируса, состояния иммунитета и других факторов.

Различают несколько стадий ВИЧ инфекции:

1.Инкубационный период (от момента заражения до определения антител к ВИЧ в крови). Длительность периода — около месяца. Анализ кровь на ВИЧ отрицателен, но человек уже может быть заразен.

Стадия первичных проявлений. На данной стадии анализ крови на ВИЧ положителен. Он может никак не проявляться, но у трети больных возникают симптомы, схожие с гриппом: повышение температуры, боль в горле, мышечные боли, увеличение лимфоузлов. Состояние проходит самостоятельно через несколько недель без лечения.

3.Бессимптомый период. Данный период длится многие годы (в среднем около 10 лет). У пациентов постепенно ухудшается иммунитет, в конце стадии возникают оппортунистические инфекции и злокачественные опухоли. Анализ крови на ВИЧ положителен в этой стадии.

4.Стадия СПИД

Иммунная система в этой стадии достигла пика своего угнетения. Анализ крови на СПИД всегда выявляет антитела к ВИЧ, возможно в меньшем количестве. Характерны для данной стадии онкологические заболевания, поражения нервной системы, тяжелые инфекционные заболевания (туберкулез, пневмоцистная пневмония и др.)

Анализ на ВИЧ в Нижнем Новгороде. Анализ на ВИЧ анонимно.

Анализ на ВИЧ в Нижнем Новгороде вы можете сдать в нашем центре «Тонус Лаборатория». Наши высокоточные приборы быстро и достоверно определят ваш ВИЧ — статус.У нас возможно сдать анонимно анализы на ВИЧ — никто не узнает, что вы проходили в нашем центре данное диагностическое исследование, мы соблюдаем полную конфиденциальность.

Чтобы сдать анализ на ВИЧ специальной подготовки не требуется. Рекомендуется не принимать пищу за 4 часа до забора крови на ВИЧ.

Сдать анализ на ВИЧ следует не раньше месяца с момента инфицирования и повторить его через 3 и 6 месяцев, если результат отрицателен. Анализы не могут назначаться в принудительном порядке или без вашего согласия. Вы можете сдать анализ на ВИЧ анонимно — это ваше право.

Чем скорее будет поставлен диагноз и начато лечения, тем лучше прогноз для пациента.

Сдать анализ крови на ВИЧ следует в следующих случаях

Увеличение лимфоузлов в двух и более областях
Лейкопения (в особенности за счет лимфопении) в анализе крови
Ночная потливость
Похудание неизвестной природы
Диарея неясной природы длительностью более 3 недель
Лихорадка неясной природы
Планирование беременности
При подготовке к операции или госпитализации
При инфекциях: туберкулез, токсоплазмоз, рецидивирующий опоясывающий лишай, кандидоз внутренних органов, пневмоцистная или микоплазменная пневмония и другие.
При выявлении саркомы Капоши
Случайные половые контакты

Анализ крови на СПИД (ВИЧ) выполняется с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) и является скрининговым методом. Выражается качественно: положительный или отрицательный.

Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к ВИЧ ½ в сывортке крови. Отрицательный результат лаборатория выдает сразу по его готовности. При получении положительного результата – выявлении антител к ВИЧ – во избежание ложноположительных результатов в лаборатории анализ повторяют еще 2 раза. Вне зависимости от полученных результатов исследования проба крови пациента и результаты 3 исследований направляются лабораторией в региональный центр СПИДа для подтверждения положительного результата и верификации неопределенного результата(исследование методом иммуноблота). Этот анализ на СПИД (ВИЧ) проводится при положительном анализе еще раз в другой (второй) пробе от пациента.

Однако ВИЧ-инфекция выявляется уже спустя 2 недели после заражения путем анализа на антиген p24 и уже через 1 неделю - путем анализа на вирусную РНК. Другими словами, период окна можно сократить до 2 недель и более с помощью комплексного диагностического подхода. Капсидный антиген p24 появляется в крови при бурной репликации вируса в острой лихорадочной фазе ВИЧ-инфекции и в этот период легко обнаруживается с помощью простого и сравнительно дешевого ИФА.

Если стоит задача выявить всех ВИЧ-инфицированных, в том числе лиц с ранними стадиями инфекции, то необходимо использовать весь арсенал анализов: на антитела, на антигены и на РНК. Однако тестирование на вирусную РНК дорого стоит, требует больших трудозатрат и недоступно для большинства лабораторий. И все же те лаборатории, в которых есть оборудование для ИФА, способны выявлять большинство случаев ВИЧ-инфекции при условии тестирования проб как на антитела к ВИЧ, так и на антиген p24.

В конце 1990-х гг. появились тест-системы для параллельного ИФА на антитела к ВИЧ и антиген p24, снявшие необходимость проведения раздельных анализов. Разработано и внедряется новое поколение комбинированных тест-систем для одновременного выявления антител к ВИЧ и антигенов ВИЧ.

Преимущество комбинированных анализов заключается в том, что они занимают меньше времени, требуют меньших трудозатрат и экономически более выгодны, чем раздельные анализы. Комбинированные тест-системы обладают высокой аналитической чувствительностью как за счет применения сэндвич-ИФА с двумя антигенами для выявления антител к ВИЧ, так и за счет одновременного выявления антигена p24.

В настоящее время на рынке имеется 8 комбинированных тест-систем четвертого поколения, прошедших клинические испытания: VIDAS HIV DUO Ultra (bioMérieux; Марси-л’Этуаль, Франция); Enzymun-Test-HIV-Combi (Boehringer; Мангейм, Германия); Vironostika HIV Uni-Form II Ag/AB (Organon Teknika; Бокстел, Нидерланды); AxSYM-HIV Ag/AB (Abbott Laboratories; Эбботт-Парк, Иллинойс, США); Enzygnost HIV Integral (Dade Behring; Марбург, Германия); Genescreen Plus HIV Ag-AB (Bio-Rad), and COBAS Core HIV Combi (Roche Diagnostics; Мангейм, Германия); Elecsys-HIV Combi (Boehringer; Мангейм, Германия). В последней тест-системе применен электрохемилюминесцентный сэндвич-метод с двумя антигенами; анализ занимает 18 минут; специфичность по данным испытаний на госпитализированных больных составляет 99,8%. Эта тест-система позволяет диагностировать ВИЧ-инфекцию на 5 дней раньше, чем самые чувствительные тест-системы на антитела к ВИЧ. Существует еще одна комбинированная тест-система без торговой марки для ИФА на антитела и антиген p24 с чувствительностью всего 99,5% и специфичностью 94,8%.

Комбинированный анализ на антитела и антиген для выявления недавней и длительно существующей ВИЧ-инфекции оправдан не только при тестировании доноров крови, но и во многих клинических ситуациях. Ранний диагноз ВИЧ-инфекции путем выявления антигена p24 позволяет безотлагательно начать лечение, провести консультирование больного и принять меры для снижения риска передачи инфекции. Благодаря способности выявлять антиген p24 тест-системы четвертого поколения позволяют диагностировать ВИЧ-инфекцию на ранних стадиях. Эти тест-системы весьма полезны для диагностики недавней и длительно существующей ВИЧ-инфекции в больничных и независимых клинических лабораториях и диагностических центрах (как бюджетных, так и коммерческих). В подобные учреждения нередко обращаются пациенты, риск ВИЧ-инфекции у которых значительно выше, чем у доноров крови. Для раннего выявления ВИЧ-инфекции у таких пациентов требуются тест-системы с высокой аналитической чувствительностью.

Важно отметить, что высокая аналитическая и эпидемиологическая чувствительность большинства тест-систем четвертого поколения, доказанная в испытаниях на больных из разных популяций, больных с сероконверсией и больных с разными подтипами ВИЧ, делает эти тест-системы незаменимыми для диагноза как недавней, так и длительно существующей ВИЧ-инфекции в самых разных ситуациях. Так, например, в клинических лабораториях бюджетных учреждений здравоохранения тестирование крови на антигены ВИЧ обычно не проводится (это прерогатива станций переливания крови), и поэтому при стандартном тестировании на антитела к ВИЧ случаи недавней инфекции могут быть пропущены. Было показано, что выявление инфекции на ранних стадиях дает основание вовремя начать антиретровирусную терапию, что повышает ее эффективность. Кроме того, появляется возможность своевременно проконсультировать пациента, правильно организовать его ведение и предотвратить передачу ВИЧ-инфекции.

Экспресс-тесты: Это класс тест-систем, дающих результат быстрее, чем через 30 минут. Экспресс-тесты для выявления специфических антител к ВИЧ появились в конце 1980-х гг., а в начале 1990-х гг. приобрели популярность. Благодаря усовершенствованию технологии производства экспресс-тесты стали не менее точными, чем ИФА (при условии, что анализ проводится аккуратно, квалифицированным сотрудником). Однако из-за мнимой простоты экспресс-тестов персонал часто допускает ошибки. Например, при внесении реагентов пипетки не всегда держат вертикально (как указано в инструкции), что нарушает соотношение объемов реагентов. Еще один источник ошибок - стремление многих лаборантов одновременно провести анализ нескольких проб. Из-за этого не выдерживается время этапов анализа.

При правильном выполнении экспресс-тесты на антитела к ВИЧ дают надежные результаты и могут использоваться в самых разных медицинских учреждениях и клинических ситуациях. В частности, их применяют в приемных отделениях, кабинетах врачей, амбулаториях, патологоанатомических отделениях, моргах, пунктах переливания крови, а также везде, где требуется срочное тестирование на ВИЧ (например, после контакта медицинского работника с возможным источником инфекции).

Экспресс-тесты на ВИЧ незаменимы для тестирования рожениц, за которыми не проводилось дородовое наблюдение (т. е. рожениц с невыясненным ВИЧ-статусом). Показано, что антиретровирусная терапия (в частности, зидовудином) эффективно снижает риск вертикальной передачи ВИЧ и что такое лечение в максимально ранние сроки необходимо матери, а затем и новорожденному. Экспресс-тестирование беременной на ВИЧ в предродовом периоде позволяет в случае выявления антител начать лечение до родов.

HIV 1, 2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)

Анализ на ВИЧ методом исследование специфических антител и антигена p24 вируса иммунодефицита человека.

Антитела к ВИЧ 1, 2, антитела к вирусу иммунодефицита человека, ВИЧ-1 p24, ВИЧ-1-антиген, p24-антиген.

Anti-HIV, HIV antibodies, human immunodeficiency virus antibodies, HIV-1 p24, HIV-1 Ag, p24-antigen.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) – вирус семейства ретровирусов, который поражает клетки иммунной системы человека (CD4, Т-хелперы). Вызывает СПИД.

ВИЧ-1 – наиболее распространенный тип вируса, чаще всего встречающийся в России, США, Европе, Японии и Австралии (как правило, субтип В).

ВИЧ-2 – редкий тип, распространен в Западной Африке.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека используется комбинированная тест-система четвертого поколения, способная определять ВИЧ-инфекцию уже через 2 недели после попадания вируса в кровь, тогда как тест-системы первого поколения делают это только через 6-12 недель с момента инфицирования.

Преимуществом этого комбинированного ВИЧ-анализа является выявление, благодаря использованию антител к ВИЧ-1 p24 в качестве реагентов, специфического антигена p24 (белка вирусного капсида), который может быть обнаружен данным тестом уже через 1-4 недели с момента инфицирования, т. е. еще до сероконверсии, что значительно сокращает «период окна».

Кроме того, такой анализ на ВИЧ выявляет в крови антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 (с использованием реакции антиген-антитело), которые вырабатываются в достаточном количестве для определения тест-системой через 2-8 недель с момента заражения.

После сероконверсии антитела начинают связываться с антигеном p24, в результате чего тест на антитела к ВИЧ будет положительным, а тест на p24 – отрицательным. Однако спустя некоторое время в крови будут определяться и антитела, и антиген одновременно. На терминальной стадии СПИД-тест на антитела к ВИЧ может давать отрицательный результат, так как нарушается механизм выработки антител.

Инкубационный период, или «период серонегативного окна», – время с момента заражения до выработки в крови защитных антител к вирусу, когда тесты на антитела к ВИЧ отрицательны, но человек уже может передавать вирус другим людям. Продолжительность данного периода – от 2 недель до 6 месяцев.
Период острой ВИЧ инфекции наступает в среднем через 2-4 недели с момента инфицирования и длится примерно 2-3 недели. На данном этапе у некоторых людей могут развиться неспецифические симптомы, схожие с симптомами гриппа, что связано с активной репликацией вируса.
Латентная стадия протекает бессимптомно, но в течение нее происходит постепенное снижение иммунитета и увеличение количества вируса в крови.
СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) является конечной стадией развития ВИЧ-инфекции, которая характеризуется сильным угнетением иммунной системы, а также сопутствующими заболеваниями, энцефалопатией или онкологическими заболеваниями.

Несмотря на то что ВИЧ-инфекция неизлечима, сегодня существует высокоактивная антиретровирусная терапия (АРВТ), которая может значительно продлить жизнь ВИЧ-инфицированного и улучшить ее качество.

Данный тест имеет особенно высокую диагностическую ценность, если инфицирование ВИЧ произошло незадолго до момента тестирования (за 2-4 недели).

Для чего используется исследование?

Анализ используется для ранней диагностики ВИЧ, что позволяет предотвратить дальнейшую передачу вируса другим людям, а также своевременно начать антиретровирусную терапию и лечение заболеваний, способствующих прогрессированию ВИЧ-инфекции.

Когда назначается исследование?

При устойчивой симптоматике (на протяжении 2-3 недель) неясной этиологии: субфебрильной температуре, поносе, ночной потливости, резкой потере веса, увеличении лимфатических узлов.
При рецидивирующей герпетической инфекции, вирусных гепатитах, пневмонии, туберкулезе, токсоплазмозе.
Если пациент страдает заболеваниями, передающимися половым путем (сифилисом, хламидиозом, гонореей, генитальным герпесом, бактериальным вагинозом).
Если у пациента был незащищенный вагинальный, анальный или оральный секс с несколькими половыми партнерами, новым партнером или партнером, в ВИЧ-статусе которого пациент не уверен.
Когда пациент проходил процедуру переливания донорской крови (хотя случаи инфицирования таким путем практически исключены, т. к. кровь тщательно тестируется на наличие вирусных частиц и подвергается специальной термообработке).
Если пациент употреблял наркотики инъекционным путем, используя нестерильные инструменты.
При беременности / планировании беременности (прием азидотимидина во время беременности, кесарево сечение во избежание передачи вируса ребенку в момент прохождения через родовые пути и отказ от кормления грудью снижают риск передачи ВИЧ от матери к ребенку с 30 % до 1 %).
Случайный укол шприцом или другим предметом (например, медицинским инструментом), содержащим в себе инфицированную кровь (в таких случаях вероятность инфицирования крайне низкая).

Референсные значения (норма анализа на ВИЧ)

Причины отрицательного результата:

отсутствие ВИЧ-инфекции,
период серонегативного окна (ни антиген, ни антитела еще не выработались в достаточном количестве, необходимом для определения тест-системой).

Причины положительного результата:

Диагностика антител к ВИЧ у детей грудного возраста, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, затруднена, так как младенец получает антитела от матери через плацентарную кровь. Как правило, тест на антитела к ВИЧ у таких детей становится отрицательным не позднее 18 месяцев, если ребенок не инфицирован ВИЧ.
С помощью данного ВИЧ-теста невозможно определить, как давно произошло инфицирование, или стадию ВИЧ (например, СПИД).
ВИЧ содержится практически во всех жидкостях организма, но только в крови, сперме и вагинальном секрете концентрация вируса достаточна для инфицирования. Кроме того, вирус нестабилен и способен жить лишь в жидких средах человеческого организма, поэтому ВИЧ-инфекция не передается через поцелуй, укусы насекомых и при бытовых контактах (например, при использовании общего туалета, через слюну, воду и пищевые продукты).
Данный анализ на ВИЧ хотя и сокращает «период окна», но все же способен определить наличие антигена/антител не ранее чем через 1-3 недели с момента возможного инфицирования.
Если событие, грозящее заражением ВИЧ-инфекцией, произошло менее чем за 1-3 недели до тестирования, рекомендуется повторить тест.
Анализы первого и третьего поколений могли давать ложноположительный результат, если в крови обследуемого присутствовали антитела к вирусу Эпштейна – Барр, ревматоидному фактору, главному комплексу гистосовместимости HLA или антитела после введения вакцины против ВИЧ. Однако вероятность ложноположительного результата при комбинированном тесте практически исключена.
В случае положительного результата тестирования проводится подтверждающий анализ с использованием метода иммуноблотинга (тест на антитела к ряду специфических белков вируса).

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, инфекционист, дерматовенеролог.

Анализ на антитела к ВИЧ 1/2

Современная диагностика

Анализ на остеокальцин и Анализ на паратиреоидный гормон

Антитела к ВИЧ 1/2 – составляющие плазмы крови, белковой природы, которые препятствуют размножению ВИЧ-инфекции и полностью нейтрализуют их негативное влияние.

Что такое анализ на антитела к ВИЧ 1/2 (скрининг)

Скрининговый анализ на антитела к ВИЧ 1,2 – система тестов, которые позволяют выявить лиц, инфицированных вирусом иммунодефицита. Помимо этих, существуют и так называемые подтверждающие (вспомогательные)тесты, задача которых заключается в том, чтобы выявить лиц не инфицированных вирусом, но с положительной реакцией на вирус при скрининге.

Суть скринингового исследования ВИЧ-инфекции заключается в определении антител к вирусу иммунодефицита. Его отличительная особенность в повышенной чувствительности – более, чем 99,5%. Специфика тестирования состоит в том, что скрининг может дать ложноположительный результат, если в организме пациента содержатся аутоантитела.

Идентичный результат может быть выявлен и в случае болезни печени у пациента, противогриппозной вакцинации или же наличия какого-либо острого вирусного заболевания. Исходя из этого, для получения точных результатов, наряду со скринингом, обычно принято делать и упомянутый выше, подтверждающий тест.

Показания для анализа

В медицинской практике существует достаточно обширный спектр показаний для прохождения скринингового обследования. Пациент может обратиться в лабораторию в случае:

возникновения подозрения на инфицирование (если имелся близкий контакт с носителем ВИЧ-инфекции);
при потерях веса, лихорадке;
пневмонии, которая не поддается обычной терапии;
заболеваниях хронического характера, возникших по непонятным причинам;
в процессе подготовки к хирургической операции;
переливания крови;
планировании беременности и семьи;
При воспаленных лимфоузлах;
Случайных половых связях.

Лица, попадающие в особую группу риска: наркоманы и люди, ведущие беспорядочную половую жизнь.

Как проводится скрининг на на антитела к ВИЧ 1/2

Проведение процедуры подразумевает соблюдение ряда необходимых правил:

пациент должен сдавать кровь исключительно натощак (пить воду разрешено);
с момента последнего приема пищи должно пройти не менее восьми часов;
врач должен быть уведомлен о том, какие лекарства принимает пациент и знать дозировку (если нет возможности даже кратковременной их отмены);
если пациент в состоянии повременить с применением лекарственных средств, ему рекомендовано это сделать задней до дня манипуляции;
за день до начала тестирования пациенту желательно отказаться от приема жареных или жирных продуктов, также ему запрещено употреблять алкогольные напитки, курить, ограничить тяжелые физические нагрузки.

Необходимо отметить, что лабораторные исследования на наличие инфекции у детей, которые были рождены от матерей-носителей вируса иммунодефицита, имеют свою специфику.

Поскольку в первые месяцы жизни ребенка, в его крови могут присутствовать материнские антитела к ВИЧ, то по результатам анализа невозможно получить объективную картину о состоянии здоровья новорожденного и даже отрицательный результат отнюдь не означает, что вирус не смог проникнуть через плацентарный барьер. Для получения точных данных тестирования следует проводить в период 36 месяцев после рождения ребенка.

Остеокальцин синтезируются при помощи остеобластов. Витамин играет роль связывания гидроксиапатитов

ПТГ является полипептидным веществом, которое вырабатывается паращитовидными железами. ПТГ

Кальцитонин является гормоном, который синтезируется в щитовидной железе, контролирует обмен

ТТГ регулирует деятельность щитовидной железы и вырабатывается в гипофизе.

Многопрофильная клиника Израиля проводит диагностику и лечение по всем клиническим направлениям.

Современное диагностика и лечение в многопрофильной больнице Израиля: терапия, хирургия, педиатрия,

Современное диагностика и лечение в ведущей больнице Израиля: интенсивная терапия, хирургия,

Современное диагностика и лечение в медицинском центре Израиля: терапия, хирургия, педиатрия,

Антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2 (HIV Ag/Ab Combo)

Антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2 (HIV Ag/Ab Combo) - полное описание диагностики, показания к выполнению, расшифровка результатов.

Антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2 (HIV Ag/Ab Combo) – антитела, образовавшиеся в организме при инфицировании вирусом иммунодефицита человека.

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) представитель семейства ретровирусов, он повреждает клетки иммунной системы. Вирус бывает двух типов, ВИЧ-1 встречается чаще, ВИЧ-2 – преимущественно в странах Африки.

ВИЧ встраивается в клетки человека, вирусные частицы размножаются, в результате на поверхности клеток появляются антигены вируса, к которым и вырабатываются соответствующие антитела. Их обнаружение в крови позволяет поставить диагноз ВИЧ-инфекции.

Выявить антитела к вирусу иммунодефицита человека можно через три-шесть недель после проникновения вируса в кровь. Резкое увеличение вируса в крови характерно для стадии первичных проявлений, этот период приходится на третью-шестую неделю с момента инфицирования и называется «сероконверсией». В это время инфекцию можно выявить лабораторно, а клинически она либо не проявляется вообще, либо протекает как простудное заболевание с увеличением лимфатических узлов.

Через 12 недель от момента заражения антитела обнаруживаются практически у всех заболевших. На последней стадии заболевания, называемой СПИД, количество антител уменьшается.

На каком сроке с момента заражения будет обнаружена ВИЧ-инфекция, зависит от тест-системы, применяемой в конкретной лаборатории. Комбинированные тест-системы четвертого поколения обнаруживают ВИЧ-инфекцию через две недели с момента попадания в кровь вируса. А тест-системы первого поколения обнаруживали ВИЧ лишь спустя 6-12 недель.

При выполнении комбинированного анализа возможно выявление антигена р24 ВИЧ, который является капсидом вируса. Он определяется в крови спустя 1-4 недели после инфицирования, ещё до нарастания концентрации антител в крови (до «сероконверсии»). Также при комбинированном исследовании обнаруживаются антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, доступные для диагностики через две-восемь недель после инфицирования.

До сероконверсии в крови обнаруживаются и р24, и антитела к ВИЧ-1, к ВИЧ-2. После сероконверсии антитела связывают антиген р24, поэтому р24 не обнаруживается, а антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 выявляются. Затем в крови снова обнаруживаются и р24, и антитела к ВИЧ-1, к ВИЧ-2. Когда у ВИЧ-инфицированного развивается СПИД, выработка антител нарушается, поэтому антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 могут отсутствовать.

Диагностика ВИЧ-инфекции проводится на этапе планирования беременности и при текущем наблюдении беременной женщины, поскольку ВИЧ-инфекция может передаваться от женщины к плоду во время беременности, в родах и при грудном вскармливании.

Показания к выполнению ВИЧ диагностики

Случайные половые контакты.

Лихорадка без объективных причин.

Увеличение лимфатических узлов в нескольких анатомических областях.

Подготовка к исследованию

Исследование на ВИЧ проводят через 3-4 недели от момента предполагаемого заражения. Если результат отрицателен, анализ повторяют через три и шесть месяцев.

От последнего приёма пищи до взятия крови временной промежуток должен быть более восьми часов.

Накануне исключить из рациона питания жирные продукты, не принимать спиртные напитки.

За 1 час перед взятием крови на анализ нельзя курить.

Кровь на исследование сдают утром натощак, исключается даже чай или кофе.

Допустимо пить обычную воду.

Материал для исследования

Расшифровка результатов ВИЧ диагностики

Анализ является качественным. Если антитела к ВИЧ не обнаружены, в ответе указано «отрицательно».

Если антитела к ВИЧ обнаруживаются, анализ повторяют с другой серией тестов. Повторный положительный результат требует проведения исследования методом иммуноблота, «золотого стандарта» ВИЧ-диагностики.

Человек не инфицирован ВИЧ.
Терминальная стадия ВИЧ-инфекции (СПИД).
Серонегативный вариант ВИЧ-инфекции (позднее образование антител к ВИЧ).

Человек инфицирован ВИЧ.
Тест не информативен у детей до полутора лет, рождённых от ВИЧ-инфицированных матерей.
Ложноположительный результат при наличии в крови антител к вирусу Эпштейна-Барр, главному комплексу гистосовместимости, ревматоидному фактору.

Выберите беспокоящие вас симптомы, ответьте на вопросы. Выясните, насколько серьезна ваша проблема и нужно ли обращаться к врачу.

Перед использованием информации, предоставляемой сайтом medportal.org, пожалуйста, ознакомьтесь с условиями пользовательского соглашения.

Пользовательское соглашение

Сайт medportal.org предоставляет услуги на условиях, описанных в настоящем документе. Начиная пользоваться веб-сайтом Вы подтверждаете, что ознакомились с условиями настоящего Пользовательского соглашения до начала пользования сайтом, и принимаете все условия данного Соглашения в полном объеме. Пожалуйста, не пользуйтесь веб-сайтом, если Вы не согласны с данными условиями.

Вся информация, размещённая на сайте, носит справочный характер, информация взята из открытых источников является справочной и не является рекламой. Сайт medportal.org предоставляет услуги, позволяющие Пользователю производить поиск лекарственных средств в данных, полученных от аптек в рамках соглашения между аптеками и сайтом medportal.org. Для удобства пользования сайтом данные по лекарственным средствам, БАД систематизируются и приводятся к единому написанию.

Сайт medportal.org предоставляет услуги, позволяющие Пользователю производить поиск клиник и другой информации медицинского характера.

Размещенная в результатах поиска информация не является публичной офертой. Администрация сайта medportal.org не гарантирует точность, полноту и (или) актуальность отображаемых данных. Администрация сайта medportal.org не несет ответственности за вред или ущерб, который Вы могли понести от доступа или невозможности доступа к сайту или от использования или невозможности использования данного сайта.

Принимая условия настоящего соглашения, Вы полностью понимаете и соглашаетесь с тем, что:

Информация на сайте носит справочный характер.

Администрация сайта medportal.org не гарантирует отсутствия ошибок и расхождений относительно заявленного на сайте и фактического наличия товара и цен на товар в аптеке.

Пользователь обязуется уточнить интересующую его информацию телефонным звонком в аптеку или использовать предоставленную информацию по своему усмотрению.

Администрация сайта medportal.org не гарантирует отсутствия ошибок и расхождений относительно графика работы клиник, их контактных данных – номеров телефонов и адресов.

Ни Администрация сайта medportal.org, ни какая-либо другая сторона, вовлеченная в процесс предоставления информации, не несет ответственности за вред или ущерб, который Вы могли понести от того, что полностью положились на информацию, изложенную на этом веб-сайте.

Администрация сайта medportal.org предпринимает и обязуется предпринимать в дальнейшем все усилия для минимизации расхождений и ошибок в предоставленной информации.

Администрация сайта medportal.org не гарантирует отсутствия технических сбоев, в том числе в отношении работы программного обеспечения. Администрация сайта medportal.org обязуется в максимально короткие сроки предпринять все усилия для устранения каких-либо сбоев и ошибок в случае их возникновения.

Пользователь предупрежден о том, что Администрация сайта medportal.org не несет ответственности за посещение и использование им внешних ресурсов, ссылки на которые могут содержаться на сайте, не предоставляет одобрения их содержимого и не несет ответственности за их доступность.

Администрация сайта medportal.org оставляет за собой право приостановить действие сайта, частично или полностью изменить его содержание, внести изменения в Пользовательское соглашение. Подобные изменения осуществляются только на усмотрение Администрации без предварительного уведомления Пользователя.

Вы подтверждаете, что ознакомились с условиями настоящего Пользовательского соглашения, и принимаете все условия данного Соглашения в полном объеме.

FAQ: Тестирование на ВИЧ

Для скрининга применяется метод ИФА. Для подтверждения диагноза применяется иммуноблот. Подробнее - ниже. Для выявления ВИЧ применяется качественный (т.е. есть или нет, без ответа на вопрос «сколько?») ПЦР РНК или ДНК ВИЧ, данный метод является по сути вспомогательным и его не следует использовать для скрининга ВИЧ-инфекции. У лиц с диагностированной ВИЧ-инфекцией применяется количественный метод ПЦР на РНК ВИЧ, он позволяет ответить на вопрос: сколько вируса в крови?. Его так же не следует применять для диагностики.

Чем лучше тесты 4 поколения? Чем отличается разные поколения ИФА?

Они детектируют ВИЧ-инфекцию раньше, так как «видят» не только антитела, которые вырабатываются в ответ на ВИЧ-инфекцию, и на выработку которых нужно некоторое время, но и непосредственно антиген ВИЧ p24. Антиген ВИЧ p24, это белок вирусного капсида (core компонент), суть - непосредственно кусочек вируса, понятно, что он начинает определяться в крови ранее, чем антитела - белки иммунной системы человека, которые вырабатываются в ответ на ВИЧ-инфекцию. Т.е. «период окна» для теста 4 поколения совсем небольшой. Когда начинают обнаруживаться в большом антитела против ВИЧ, антиген p24 часто уже не выявляется, вероятнее всего в результате образования комплекса между антигеном и антителами в крови. В случаях его обнаружения антиген p24 является высокоспецифическим индикатором инфекции.

Время возникновения надежной положительной реакции для ИФА тест-систем первого (1), второго (2), третьего (3) и четвертого (4) поколений, методов ПЦР-диагностики (N). АГ - антиген ВИЧ p24, АТ - антитела к ВИЧ, E -эклипс-фаза, ранняя стадия внутриклеточной репликации вируса.

Может быть так, что антиген уже связан антителами, а антител еще мало для теста?

Нет, если ВИЧ есть в организме, и если антитела смогли связать так много антигена, что АГ-линия теста его перестает видеть, то она однозначно уже выявит антитела к ВИЧ, и тест все равно будет положительный.

Какого поколения был мой тест?

Для Российской Федерации - четвертного, иных у нас не ввозится и не используется. В названии теста обычно присутствует что-либо из: «Combo», «At/Ag», «АТ/АГ» или «p24».

Какой период «окна» для тестов 4 поколения (Ag/At Combo)?

Тест-системы 4 поколения способны обнаружить не только антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию, но и непосредственно ВИЧ, посредством выявления вирусного белка p24. Белок p24 может быть определен очень рано, но его уровень в крови в период после инфицирования постепенно снижается, но одновременно с этим снижением нарастает уровень антител. Все люди разные, потому назвать точный 100% минимальный срок, когда сомневаться в тесте уже нет поводов - невозможно. Однако, на сегодня есть достаточное количество исследований, которые дают нам весьма определенные ориентиры, приведем лишь несколько из них:

Так все же, с какого срока ИФА 4 поколения совершенно надежно исключает ВИЧ.

Тест 4 поколения может в отдельных случаях выявлять ВИЧ-инфекцию уже через неделю после инфицирования, но ориентироваться на это все же нельзя, потому как это скорее исключение. Как Вы видели выше - месяц вполне надежный срок для современных лабораторных тест-систем.

У 950 из 1000 человек ИФА тест 3 поколения или только АТ-линия теста 4 поколения выявит антитела к ВИЧ через 4 недели. Оставшиеся 49 человек выявят антитела на 5, 6, 7, 8 неделе, и совершенно точно через 12 недель. Остается вот этот 0,1%, который медицина оставит на всякий редкий и казуистический случай. Но, важно заметить, что мы только что говорили лишь о антителах, а тесты 4 поколения выявляют еще и антиген ВИЧ, известно, что АГ в промежутке с 1 по 8 неделю будет выявлен у 95% инфицированных, и в сумме АГ и АТ линия тест-системы даст лучшие параметры, чем 95% через 4 недели или 99,9% к 12 неделе. Надежнее быть не может, этого совершенно достаточно.

Если Вы считаете, что у Вас был рискованный контакт, то сделайте ИФА после 6 неделе после опасного контакта - достоверность отрицательного результата будет предельно близка к 99,9%. Многие эксперты считают срок в 6 недель для ИФА 4 поколения в условиях лаборатории совершенно достаточным для исключения ВИЧ-инфекции, но даже самые консервативные руководства не рассматривают целесообразность повторного тестирования после 12 недель. Выводы делайте сами.

На любых сроках от потенциально опасной ситуации после 6-12 недель ИФА не увеличивает и не теряет своей надежности, оставаясь точным методом диагностики и через год, и через два и далее. В очень редких случаях диагностические проблемы могут возникать у очень тяжелых, фактически терминальных пациентов, с развернутой картиной СПИДа. Подробнее можно почитать об этом здесь, также там даны ответы на вопросы о т.н. поздней сероконверсии.

Я тестировался на разных сроках, в том числе и через 6-8 недель, и через 12 недель (3 месяца после возможного контакта) и не могу успокоиться, потому как наблюдаю различные симптомы, в некоторых результатах анализов есть отклонения и т.д. и т.п. Что делать? Что мне еще сдать?

Ничего, в данном случае вы имеете дело с неким иным заболеванием, и скорее всего с тревожным или тревожно-депрессивным расстройством, и все, что вы ощущаете, наблюдаете есть психиатрия, получите консультацию квалифицированного инфекциониста, а затем, если инфекционная или иная природа будет исключена, то обратитесь за помощью к психотерапевту или психиатру.

Что такое специфичность и чувствительность?

Специфичность диагностического теста – это доля верно определенных тестом заведомо отрицательных образцов. Иначе говоря, для определения специфичности теста необходимо взять несколько тысяч заведомо здоровых людей и проверить их при помощи теста. Если на каждые 1000 образцов будет получено 10 ложных положительных результатов – то специфичность теста составит: ()/1000*100%=99%. Если количество ложных срабатываний больше, то специфичность становится меньше (т.е. хуже). Так, специфичность теста 99% означает примерно 10 ложных позитивных результатов на 1000 проверенных здоровых людей.

Внимательно изучите инструкцию и материалы предлагаемых на рынке тестов, найдите информацию о том, каким образом была проверена специфичность. Как правило, это данные по испытаниям нескольких тысяч образцов, полученных из разных географических регионов.

Чувствительность диагностического теста – это доля верно определенных тестом заведомо положительных образцов. Иными словами, если мы возьмем 100 достоверно ВИЧ-инфицированных людей, проверим их тестом и получим 100 положительных результатов, то чувствительность теста будет равна 100%. Практически у всех тестов на рынке чувствительность 100%.

Нельзя путать понятия точности выявления положительных и отрицательных образцов. Точность выявления положительных образцов - это чувствительность теста, а точность выявления отрицательных образцов - это специфичность.

Чувствительный тест часто дает положительный результат при наличии заболевания (обнаруживает его). Однако, особенно информативен он, когда дает отрицательный результат, т.к. редко пропускает пациентов с заболеванием. Пример: ИФА.

Специфичный тест редко дает положительный результат при отсутствии заболевания. Особенно информативен при положительном результате, подтверждая (предположенный) диагноз. Пример: иммуноблот.

Логично использовать для скрининга (быстрого и дешевого тестирования большого числа пациентов) максимально чувствительный вид тестов, а вот для установления диагноза - максимально специфичные методы. Именно поэтому ИФА исторически является скрининговым, а иммуноблотом подтверждается ВИЧ-инфекция.

Важно понимать, что ложные положительные результаты существуют у всех тестов, никакой тест не может давать 100% специфичности! Результаты экспресс-тестов подлежат особой проверке и перепроверке в лабораторных условиях при помощи других методов. Результаты лабораторных ИФА тестов подлежат перепроверке методом иммуноблотинга.

А может ли быть ложноположительный результат (+) на ВИЧ при некоторых заболеваниях?

При простуде, при беременности, герпесе, кандидозе, стрессах, после приема любых лекарств, в полнолуние, в день, когда видишь белого коня - не имеет никакого значения, он просто может быть. Например, тест-система Abbott ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo Assay до 1,5% случаев (специфичность 98.78% ) даст ложноположительный результат. Есть состояния (беременность, например) или заболевания (ряд аутоиммунных заболеваний), когда вероятность ложноположительного результат возрастает.

Может ли что-то вызывать ложноотрицательный результат (-) в тесте на ВИЧ?

Ложноотрицательный результат, а точнее существенное удлинение «периода окна» теоретически может вызвать начатая очень рано после инфицирования антиретровирусная терапия, а также некоторые тяжелые заболевания иммунной системы. Алкоголь, иные психоактивные вещества, любая пища, БАДы, любые иные препараты, стресс, полнолуние, усталость, грипп, ангина и прочие заболевания - все это не оказывает влияния на риски ложноотрицательного результата теста на ВИЧ. Чувствительность тестов на ВИЧ исследована и подтверждена в реальных условиях и на больших выборках, где люди принимают алкоголь, нервничают, принимают самые разные препараты, болеют различными заболеваниями, имеют самые разные отклонения лабораторных параметров.

В чем разница между ИФА и ИХЛА? Что наиболее информативнее? Спасибо!

Иммуноферментный анализ (ИФА) и иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА) это два способа забить гвоздь, большим красным, или средним зеленым молотком. Результат один и тот же - АТ-АГ взаимодействие или отсутствие такового. Т.е. информация - забитый гвоздь - в итоге одна и та же. Обычно указания на ИХЛА в отношении диагностики ВИЧ носит характер артефакта, и на самом деле речь идет об ИФА. Т.е. с одной стороны - разницы нет, с другой - правильнее оперировать не названием метода, а названием тест-системы.

Выявляет ли ИФА тест 4 поколения ВИЧ-2?

Да, все современные специализированные ИФА-системы выявляют ВИЧ-1 и ВИЧ-2.

А какие подтипы выявляет ИФА? Что если я заразился редким подтипом и тест его не видит?

Нет, такого не бывает. Современные скрининговые ИФА-системы выявят любой подтип из группы M и O. Представителей групп N и P зарегистрировано единичное число, их очень непросто найти даже в Камеруне, где их число чуть больше ноля, и измеряется единицами. Как только, с точки зрения эпидпроцесса, распространенность группы превысит хотя бы сотые доли процента, и будут обнаружены в за пределами африканской глуши хотя бы единичные пациенты, то и тест-системы подтянутся, вслед за нуждами. На данный момент рассматривать подобные сценарии нет смысла.

В 2006 году их было известно десять камерунцев с группой N, но спустя 5 лет, после тщательных просеиваний тысяч камерунцев нашли еще… четыре. По разным оценкам от 400 до 800 тысяч камерунцев живут с ВИЧ, и мы знаем, что возможно до 0,1% являются носителями группы N. Т.е. от 400 до 800 человек на Планете.

Я слышала, что методом ИФА ВИЧ-2 выявляется позднее, это так?

В данном случае это не имеет значения, антитела выходит на уровень достаточный для детекции примерно в одни и те же временные рамках, общие перестраховочные сроки 6-8 недель от опасного контакта «накрывают» и ситуации с ВИЧ-1 и с ВИЧ-2.

Если ИФА положительный, то это означает диагноз ВИЧ-инфекции?

Нет, требуется подтверждение другим методом. Подтверждающим методом для диагностики ВИЧ-инфекции сегодня является непрямая иммунофлюоресценция (РНИФ, иммуноблот, вестерн-блот). Иммуноблот демонстрирует высокую чувствительность (99,3-99,7%) и специфичность (99,7%), но так как метод определяет иммунглобулины класса G, то с момента инфицирования результат может быть ложноотрицательным до трех недель.

Аптечные ИФА экспресс-тесты достаточно надежны?

Экспресс-тесты на антитела к ВИЧ в США одобрены с 2002 года, в том числе ультрабыстрые тесты, чувствительность таких тестов от 93% и специфичность - от 99%. Одобренный и доступный в РФ экспресс-тест Alere Determine HIV 1/2 Ag/Ab Combo, значительно уступает по способности к обнаружению антигена р24 ВИЧ по сравнению с коммерческими лабораторными системами 4 поколения. В одном исследовании (n=26) экспресс-тест Alere Determine выявил антиген в 62% случаев, а в другом (n=67) - в 86,6% случаев, в тестовых сыворотках без антител. В двух случаях с известной датой инфицирования Alere Determine дал положительный результат только по антителам к ВИЧ на 35 день. В ситуациях, где свежих потенциально опасных контактов не было экспресс-тестам вполне можно доверять, при отрицательном результате. Следует учитывать, что экспресс-тесты значительно чаще лабораторных дают ложный положительный результат. Положительный прогностический результат для РФ у экспресс-тестов будет примерно 50 на 50, т.е. если экспресс-тест дает положительный результат, то в среднем, т.е. для групп низкого риска, вероятность в данном случае наличия ВИЧ-инфекции лишь 50%, и любой положительный результат обязательно требует перепроверки методом ИФА в условиях лаборатории.

Можно ли применять ПЦР РНК или ДНК ВИЧ для скрининга на ВИЧ?

Да, можно. Нет, не рекомендуется. Хотя за последнее десятилетие метод стал значительно дешевле и точнее, но все же он до сих пор и дорог, более длительный, и технически сложен, что предполагает большие риски ошибок. В России, так же впрочем, как и США, количественный метод ПЦР не рекомендован для скрининга и диагностики ВИЧ-инфекции в обычных случаях.

Чем отличается ПЦР ДНК от ПЦР РНК ВИЧ?

РНК обычно используется в количественных тестах дляоценки вирусной нагрузки у диагностированных лиц, например для оценки эффективности терапии. ДНК - в мононуклеарных клетках, например для диагностики у детей, там, где антитела к ВИЧ матерей мешает использовать метод ИФА. И тот и другой тест могут быть и количественными и качественными. И тот и другой можно в узких случаях применить как диагностический, с учетом конкретных ограничений, которые накладывают технические параметры системы.

Я сдавал в коммерческой лаборатории анализ ПЦР РНК (или ДНК) ВИЧ, могу ли я исключить инфицирование?

Да, скорее всего можете, но Вы делали это зря. Выше мы писали, что метод ПЦР не применяется для скрининга, а значит нужно делать ИФА.

ВИЧ-инфекция — заболевание, вызываемое вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), длительное время персистирующим в лимфоцитах, макрофагах, клетках нервной ткани, в результате чего развивается медленно прогрессирующее поражение иммунной и нервной систем организма, проявляющееся вторичными инфекциями, опухолями, подострым энцефалитом и другими патологическими изменениями. Возбудители — вирусы иммунодефицита человека 1-го и 2-го типов — ВИЧ-1, ВИЧ-2, (HIV-I, HIV-2, Human Immunodeficiency Virus, types I, II) — относятся к семейству ретровирусов, подсемейству медленных вирусов. Вирусная частица имеет сферическую форму диаметром 100−140 нм с наружной фосфолипидной оболочкой, включающую гликопротеины (структурные белки) с определенной молекулярной массой, измеряемой в килодальтонах. У ВИЧ-1 это gp 160, gp 120, gp 41. Внутренняя оболочка вируса, покрывающая ядро, также представлена белками с известной молекулярной массой — р17, р24, р55 (ВИЧ-2 содержит gp 140, gp 105, gp 36, р16, р25, р55). Выявление антител (АТ) к вирусу иммунодефицита человека — основной метод лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. В основе метода лежит ИФА (чувствительность — более 99,5%, специфичность — более 99,8%). Также для диагностики ВИЧ-инфекции применяется определение антигена (Аг) p24 методом ИФА.

Для достоверной оценки результата обследования на ВИЧ следует помнить, что она зависит от времени, прошедшего от момента потенциального заражения:

тест на ВИЧ-инфекцию, выполненный непосредственно после потенциального заражения, не информативен, так как антитела к ВИЧ еще не образовались. По этой причине выполнение теста целесообразно не ранее 3-й недели после потенциального контакта с вирусом. Исключение составляют юридические основания (например, у медицинских работников при травме иглой, содержащей биологический материал), когда необходимо удостовериться, что на момент контакта с потенциальным носителем ВИЧ-инфекции она у данного пациента отсутствовала;
с достаточной точностью ВИЧ-инфекцию можно исключить только через 3 месяца после потенциального заражения. Поэтому после контакта с носителем инфекции обязательно выполнение контрольного обследования. Тем не менее, повторное выполнение анализа через 3 месяца (т.е. через 6 месяцев после потенциального заражения) имеет смысл только в исключительных случаях, к примеру, при наличии клинического подозрения на острый ретровирусный синдром;
отрицательный результат теста является надежным только в том случае, если в течение прошедших трех месяцев отсутствовал повторный контакт с вирусом.

При наличии клинического подозрения на острую ВИЧ-инфекцию (острый ретровирусный синдром, контакт группы риска с ВИЧ-инфицированным человеком) целесообразно выполнение ВИЧ-ПЦР. С учетом возможного ложноотрицательного результата, в общих случаях ВИЧ-ПЦР может использоваться для исключения факта передачи ВИЧ-инфекции, однако лишь условно — она не может заменить серологический анализа на ВИЧ. Поэтому метод ВИЧ-ПЦР должен применяться только в дополнение к серологическому анализу, но не вместо него. Метод ВИЧ-ПЦР, используемый в рутинной клинической практике, позволяет определять исключительно ВИЧ-1.

В ряде случаев проводят экспресс-тесты на ВИЧ-инфекцию. Эти тесты дают быстрый результат и просты в использовании, для их выполнения и оценки результатов не требуется применение специальных приборов, поэтому экспресс-тесты могут применяться непосредственно на месте оказания помощи. В качестве материала для исследования, наряду с плазмой и сывороткой крови, может использоваться также цельная или капиллярная кровь (из пальца или мочки уха), которая не требует центрифугирования. Некоторые тест-системы позволяют использовать мочу или транссудат слизистой оболочки ротовой полости. Тест показывает результат уже через 15-30 минут. Экспресс-тесты особенно подходят для ситуаций, когда результат теста влечет за собой непосредственные последствия. К примеру, это относится к таким ситуациям, как экстренные операции или травма иглой, содержащей биологический материал. При использовании данного теста существуют ограничения, касающиеся диагностики ВИЧ-инфекции до сероконверсии, поскольку почти все имеющиеся экспресс-тесты позволяют определять только антитела к ВИЧ, но не антиген p24. Экспресс-тесты должны использоваться только для первичной ориентировочной оценки. Они не подходят для подтверждения или исключения острой инфекции. Результат экспресс-теста должен быть подтвержден при первой же возможности в ходе рутинного лабораторного исследования с использованием стандартного анализа на ВИЧ.

Показания для назначения анализа крови на ВИЧ

Подготовка к сдаче анализа

Главное условие для сдачи анализа — отказ от еды минимум за 8 часов до процедуры, а также запрет на алкоголь.

Как проводится процедура?

Забор крови осуществляется амбулаторно по стандартной технологии — из вены стерильным шприцем. Для исследования достаточно 5 мл.

Антитела к вирусу иммунодефицита человека в крови

В случае инфицирования ВИЧ продукция антител начинается не ранее чем через две недели.

Антиген р24 в сыворотке крови

Антиген p24 может определяться приблизительно за 5 дней до первичного появления специфических антител. Аг р24 — белок стенки нуклеотида ВИЧ. Стадия первичных проявлений после инфицирования ВИЧ — следствие начала репликативного процесса.

Расшифровка результата анализа

Через 4 недели после заражения ВИЧ-специфические антитела определяются в 60-65 % случаев, через 6 недель — в 80 % случаев, через 8 недель — в 90 % случаев, через 12 недель — в 95 % случаев. В стадии СПИДа количество АТ может снижаться вплоть до полного исчезновения. При получении положительного ответа (выявлении АТ к ВИЧ) во избежание ложноположительных результатов анализ необходимо повторить еще один или два раза, желательно с использованием диагностикума другой серии. Результат считают положительным, если из двух — в обоих анализах или из трех — в двух анализах отчетливо выявлены АТ.

Аг р24 появляется в крови через 2 недели после инфицирования и может быть выявлен методом ИФА в период от 2 до 8 недель. Через 2 месяца от начала инфицирования Аг р24 исчезает из крови. В дальнейшем в клиническом течении ВИЧ-инфекции отмечают второй подъем содержания в крови белка р24. Он приходится на период формирования СПИД. Существующие тест-системы ИФА для детекции Аг р24 используют для раннего обнаружения ВИЧ у доноров крови и детей, определения прогноза течения заболевания и контроля за проводимой терапией. Метод ИФА обладает высокой аналитической чувствительностью, что позволяет обнаруживать Аг р24 ВИЧ-1 в сыворотке крови в концентрациях 5−10 пкг/мл и менее 0,5 нг/мл ВИЧ-2, и специфичностью. Вместе с тем следует отметить, что содержание Аг р24 в крови подвержено индивидуальным вариациям, что позволяет выявить только 20−30% пациентов с помощью этого исследования в ранний период после инфицирования.

АТ к Аг р24 классов IgM и IgG в крови появляются, начиная со 2-й недели, достигают пика в течение 2−4 нед и держатся на таком уровне различное время — АТ класса IgM в течение нескольких месяцев, исчезая в течение года после инфицирования, а АТ IgG могут сохраняться годами.

Нормы

АТ к ВИЧ 1/2 в сыворотке крови в норме отсутствуют.
Антиген р24 в сыворотке в норме отсутствует.

Заболевания, при которых врач может назначить анализ крови на ВИЧ

СПИД
В стадии СПИДа количество АТ может снижаться вплоть до полного исчезновения. На период формирования СПИД отмечается подъем содержания в крови белка р24.

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) - это вирус, который повреждает иммунную систему. А СПИД - это синдром приобретенного иммунодефицита человека. С ВИЧ-инфекцией можно жить годами и чувствовать себя хорошо, не замечая никаких симптомов заболевания. Лицо, не знающее о своей инфекции, является угрозой для окружающих. Латентный период протекает бессимптомно и может длиться от 3 недель до 15 лет. Вирусом иммунодефицита человека можно заразиться, прежде всего, во время сексуальных отношений без презерватива и через попадание в кровоток инфицированной крови (преимущественно при парентеральном введение препаратов).

Современным диагностическим методом выявления ВИЧ-инфекции является лабораторный метод диагностики, основанный на выявлении в крови человека антител или антигенов вируса иммунодефицита человека. Материалом исследования является венозная кровь.

Расшифровка результатов анализа на ВИЧ

Отрицательный результат показывает, что заражение ВИЧ не произошло. В свою очередь, положительный результат указывает на наличие в организме вируса. Такого типа тесты (так называемые скрининг-тесты) на ВИЧ определяют антитела, направленные против различных видов вируса (ВИЧ-1, ВИЧ-2), а также серологических подвидов вируса ВИЧ-1 (N, O, M).

Анализ крови на ВИЧ почти в 100% эффективный и достоверный, поэтому получение ложноотрицательного результата практически невозможно. Иногда возможно получение ложноположительного результата, что может быть связано с наличием других острых вирусных инфекций, беременностью, аутоиммунными заболеваниями.

Анализ крови на ВИЧ направлен на выявление в крови антител конкретного антигена вируса. Такого рода исследование на ВИЧ основано на цепной реакции. Если в сыворотке крови пациента обнаружены антитела, они вступят в реакцию с антигенами и вызовут соответствующее окрашивание образца крови. Исследование антител к ВИЧ не выполняется непосредственно после контакта с вирусом. Это связано с тем, что антитела образуются только через некоторое время. Слишком раннее выполнение анализа вызовет ложный отрицательный результат. Рекомендуется проведение обследования через 3 и 6 месяцев после контакта с инфицированным человеком. Тест на присутствие антител к ВИЧ является очень важным. Его выполнение совместно с тестом иммуноблоттинга позволяет проводить максимально качественное и своевременное выявление инфицированного человека и профилактику дальнейшей передачи ВИЧ-инфекции.